商品屬性：
貨號 | 規(guī)格 | 貨期 | 英文名稱 |
CS-C8935 | 400T|800T|1600T | 1～3天 | Immunofluorescence kit For Primary Antibody From Mouse (FITC) |
商品介紹：
本試劑盒采用SABC系統(tǒng)，是專為免疫化學而設計的，用以顯示組織或細胞中的抗原分布。SABC-FITC代表了傳統(tǒng)的免疫熒光方法。熒光具有簡便快速,不需顯色既可直接觀察的優(yōu)點。但染色不能保存，敏感性較低是其缺點。將鏈霉親和素—生物su引入熒光系統(tǒng)，能明顯提高敏感性及降低背景。FITC 激發(fā)光波長為 490-495nm，發(fā)射光波長為 520-530nm，呈黃綠色熒光。
保存條件：4℃可保存一年，應避免冷凍。
石蠟片染色步驟：
1. 切片脫蠟至水。
2. 根據需要選擇抗原修復方式及強度?？蔁嵝迯汀⒚感迯突虿恍迯?。
3. 封閉：滴加稀釋的正常血清封閉液(稀釋比1:10),室溫 20 分鐘。甩干，勿洗。
4. 滴加適當稀釋的一抗，37℃孵育1~2小時或4℃過夜。PBS洗5分鐘×3次。
5. 滴加稀釋的生物su標記羊抗小鼠IgM(參考效價1:100-200),37℃孵育 30分鐘。PBS洗5分鐘×3次。
6. 滴加稀釋的 SABC-FITC(參考效價1:100-200)，37℃孵育30分鐘。PBS洗5分鐘×4次。
7. 水溶性封片劑或抗熒光衰減封片劑封片。熒光顯微鏡觀察。
步驟和注意事項：?
準備實驗環(huán)境：?確保實驗區(qū)域清潔，?使用酒精清潔計數板和蓋玻片，?然后用吸水紙輕輕擦干。?
細胞培養(yǎng)：?
準備試管或培養(yǎng)皿、?細胞培養(yǎng)基和待培養(yǎng)的細胞。?
取出保存于低溫下的細胞苗，?并加入培養(yǎng)基中，?搖晃混合均勻。?
用移液管將細胞培養(yǎng)基和細胞種植在試管或培養(yǎng)皿中。?
將試管或培養(yǎng)皿放置于恒溫培養(yǎng)箱中，?定期更換培養(yǎng)液。?
細胞凍存與復蘇：?
細胞系的凍存是將生長較好的傳代細胞懸浮在加有冷凍保護劑的溶液中，?以一定的冷凍速率降至零下某一溫度，?并在此溫度下對其長期保存的過程。?
復蘇則是將凍存的細胞系恢復到常溫的過程，?原則是“慢凍快融”，?以較大限度地保存細胞活力。?
細胞計數：?
制備細胞懸液，?使用消化單層培養(yǎng)細胞或收集懸浮培養(yǎng)細胞，?制成單個細胞懸液。?
在顯微鏡下，?用10×物鏡觀察計數板四角大方格中的細胞數，?細胞壓中線時，?只計左側和上方者，?不計右側和下方者。?
熒光顯微鏡使用：?
使用熒光染料對細胞進行染色，?并觀察細胞所發(fā)出的熒光信號，?以研究細胞結構和功能。?
聚合酶鏈反應（?PCR）?：?
準備PCR反應所需的DNA模板、?引物、?聚合酶和核苷酸。?
按照PCR反應液配制表制備反應液。?
在反應器中加入反應液，?開始PCR反應。?
PCR反應的成功與否，?可以通過電泳、?測序等方法進一步確認。?
轉染：?
準備轉染所需的載體DNA和細胞。?
制備轉染試劑，?將DNA載體溶解于轉染試劑中，?與細胞混合均勻。?
處理轉染細胞，?并進行下一步實驗。?
在操作過程中，?應注意實驗室安全規(guī)范，?避免隨意丟棄垃圾，?及時登記購買耗材或試劑，?保持實驗環(huán)境的清潔和安全
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