封閉液(用PBS配置，含曲拉通X-100)免疫檢測(cè)

商品介紹：

本品是新一代的快速高效封閉液，總體效果優(yōu)于傳統(tǒng)的基于BSA(牛血清白蛋白)、脫脂奶粉、酪蛋白(Casein)等的封閉液及國(guó)外同類產(chǎn)品，可以用于Western blot (WB)、Immunofluorescence (IF)、Immunohistochemistry (IHC)、Immunocytochemitry (IC) 等實(shí)驗(yàn)中的封閉、一抗或二抗的稀釋。本產(chǎn)品配制在PBS中，含有適當(dāng)濃度Triton X-100。 按照每張膜封閉需要5-10ml封閉液計(jì)算，一個(gè)包裝的本產(chǎn)品 可以封閉10-20張膜。

商品屬性：

本封閉液快速高效。封閉時(shí)間通常僅需5-15分鐘，并且和BSA、脫脂奶粉、酪蛋白等傳統(tǒng)封閉液以及國(guó)外同類的快速 封閉液相比，顯示出更強(qiáng)的信噪比(參考下圖)。

本封閉液封閉后背景極低。本封閉液不含血清和白蛋白，確保高的信噪比。

本封閉液兼容性好，兼容辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶和生物su標(biāo)記的二抗。本產(chǎn)品中添加了不影響HRP和AP活性的防腐劑，不會(huì)干擾HRP或AP標(biāo)記二抗的檢測(cè)。同時(shí)本產(chǎn)品不含生物su，不會(huì)干擾基于生物su的檢測(cè)。

本封閉液使用靈活。本產(chǎn)品配制在含有適當(dāng)濃度Triton X-100的PBS中，可以直接用于相關(guān)實(shí)驗(yàn)，但也可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要自行添加Tween-20或Triton X-100 至終濃度為0.05%-0.1%后用于封閉、一抗或二抗的稀釋。

注意事項(xiàng)：

1. 本產(chǎn)品推薦僅使用一次，重復(fù)使用可能會(huì)導(dǎo)致封閉效果下降。但對(duì)于一些信噪比很高的一抗，例如一些內(nèi)參抗體，本封閉液可以重復(fù)使用2-3次。回收的封閉液請(qǐng)勿與未使用 過的封閉液混合。

2. 通常本產(chǎn)品用于PVDF膜及NC膜時(shí)的封閉時(shí)間為5-15分鐘。對(duì)于一些背景非常高的抗體，可以嘗試將封閉時(shí)間延長(zhǎng)為30-60分鐘。此外，如有特殊需要，也 可以4℃封閉過夜。

3. 由于沒有任何一種封閉液是適用于所有實(shí)驗(yàn)體系的，因此對(duì)于一些特殊的實(shí)驗(yàn)，可能需要根據(jù)具體情況考慮使用其它更合適的封閉液。

4. 取放PVDF膜和NC膜應(yīng)使用平頭鑷子，并僅輕輕夾取其邊角，操作過程須避免膜表面產(chǎn)生劃痕、折痕或壓痕等痕跡。

5. PVDF膜一經(jīng)浸潤(rùn)和活化，需一直保持濕潤(rùn)，根據(jù)Western進(jìn)行到的具體步驟可放置于western轉(zhuǎn)膜液或洗滌液等適當(dāng)溶液中，否則可能會(huì)產(chǎn)生難以封閉的異 常背景。

儲(chǔ)存條件：4℃，有效期一年。

步驟和注意事項(xiàng)：?

準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)環(huán)境：?確保實(shí)驗(yàn)區(qū)域清潔，?使用酒精清潔計(jì)數(shù)板和蓋玻片，?然后用吸水紙輕輕擦干。?

細(xì)胞培養(yǎng)：?

準(zhǔn)備試管或培養(yǎng)皿、?細(xì)胞培養(yǎng)基和待培養(yǎng)的細(xì)胞。?

取出保存于低溫下的細(xì)胞苗，?并加入培養(yǎng)基中，?搖晃混合均勻。?

用移液管將細(xì)胞培養(yǎng)基和細(xì)胞種植在試管或培養(yǎng)皿中。?

將試管或培養(yǎng)皿放置于恒溫培養(yǎng)箱中，?定期更換培養(yǎng)液。?

細(xì)胞凍存與復(fù)蘇：?

細(xì)胞系的凍存是將生長(zhǎng)較好的傳代細(xì)胞懸浮在加有冷凍保護(hù)劑的溶液中，?以一定的冷凍速率降至零下某一溫度，?并在此溫度下對(duì)其長(zhǎng)期保存的過程。?

復(fù)蘇則是將凍存的細(xì)胞系恢復(fù)到常溫的過程，?原則是“慢凍快融”，?以較大限度地保存細(xì)胞活力。?

細(xì)胞計(jì)數(shù)：?

制備細(xì)胞懸液，?使用消化單層培養(yǎng)細(xì)胞或收集懸浮培養(yǎng)細(xì)胞，?制成單個(gè)細(xì)胞懸液。?

在顯微鏡下，?用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格中的細(xì)胞數(shù)，?細(xì)胞壓中線時(shí)，?只計(jì)左側(cè)和上方者，?不計(jì)右側(cè)和下方者。?

熒光顯微鏡使用：?

使用熒光染料對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色，?并觀察細(xì)胞所發(fā)出的熒光信號(hào)，?以研究細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能。?

聚合酶鏈反應(yīng)（?PCR）?：?

準(zhǔn)備PCR反應(yīng)所需的DNA模板、?引物、?聚合酶和核苷酸。?

按照PCR反應(yīng)液配制表制備反應(yīng)液。?

在反應(yīng)器中加入反應(yīng)液，?開始PCR反應(yīng)。?

PCR反應(yīng)的成功與否，?可以通過電泳、?測(cè)序等方法進(jìn)一步確認(rèn)。?

轉(zhuǎn)染：?

準(zhǔn)備轉(zhuǎn)染所需的載體DNA和細(xì)胞。?

制備轉(zhuǎn)染試劑，?將DNA載體溶解于轉(zhuǎn)染試劑中，?與細(xì)胞混合均勻。?

處理轉(zhuǎn)染細(xì)胞，?并進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。?

在操作過程中，?應(yīng)注意實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)范，?避免隨意丟棄垃圾，?及時(shí)登記購(gòu)買耗材或試劑，?保持實(shí)驗(yàn)環(huán)境的清潔和安全

下列是公司正在出售的產(chǎn)品：