商品屬性：
貨號(hào) | 規(guī)格 | 貨期 | 英文名稱 |
CS-C8893 | 100ml | 1～3天 | RIPA Lysis Buffer For Western Blot |
商品介紹：
對(duì)目的蛋白進(jìn)行檢測分析時(shí)，總蛋白的提取至關(guān)重要，如蛋白提取不好會(huì)導(dǎo)致后續(xù)試驗(yàn)的不理想甚至失敗，如：信號(hào)極弱或無雜交信號(hào)、背景高、非特異性條帶多等.根據(jù)目標(biāo)蛋白的類型和實(shí)驗(yàn)應(yīng)用種類來選擇合適的RIPA裂解液，才能大程度地保證后續(xù)實(shí)驗(yàn)的成功。而RIPA Lysis Buffer For Western Blot對(duì)動(dòng)物組織和細(xì)胞的裂解能力，它可以裂解細(xì)胞核和線粒體，并可提取到更多的膜蛋白，從而可獲得更多的總蛋白。因其強(qiáng)的裂解能力，使得大量的基因組DNA從細(xì)胞核中釋放出來，使蛋白變的十分粘稠，使用Benzonase核酸酶(貨號(hào)：MT0068)消化可有效解決。經(jīng)我司RIPA裂解液獲得得蛋白可用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度；使用Bradford法測定由本裂解液裂解所得到樣品的蛋白濃度會(huì)稍有誤差。
RIPA裂解緩沖液(Western Blot)
產(chǎn)品特點(diǎn)：
1．可以很好的裂解細(xì)胞膜及細(xì)胞核，從而更好的釋放胞漿蛋白、核蛋白和膜蛋白。
2．對(duì)于核蛋白，經(jīng)本品裂解后，核蛋白與粘稠的基因組DNA分離，離心后核蛋白存在于上清中，核蛋白的捕獲率高達(dá)90%。
3．對(duì)于膜蛋白，Western Blot RIPA Lysis Buffer可大程度的破壞細(xì)胞膜和變性蛋白，使蛋白與膜分離，防止蛋白與膜復(fù)合物在離心后沉淀，從而防止蛋白丟失。
4．在提取蛋白過程中，基因組DNA釋放使得蛋白提取液變的十分粘稠，使用Benzonase核酸酶消化可有效解決。
儲(chǔ)存條件：置于室溫陰涼處，可保存2年。
步驟和注意事項(xiàng)：?
準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)環(huán)境：?確保實(shí)驗(yàn)區(qū)域清潔，?使用酒精清潔計(jì)數(shù)板和蓋玻片，?然后用吸水紙輕輕擦干。?
細(xì)胞培養(yǎng)：?
準(zhǔn)備試管或培養(yǎng)皿、?細(xì)胞培養(yǎng)基和待培養(yǎng)的細(xì)胞。?
取出保存于低溫下的細(xì)胞苗，?并加入培養(yǎng)基中，?搖晃混合均勻。?
用移液管將細(xì)胞培養(yǎng)基和細(xì)胞種植在試管或培養(yǎng)皿中。?
將試管或培養(yǎng)皿放置于恒溫培養(yǎng)箱中，?定期更換培養(yǎng)液。?
細(xì)胞凍存與復(fù)蘇：?
細(xì)胞系的凍存是將生長較好的傳代細(xì)胞懸浮在加有冷凍保護(hù)劑的溶液中，?以一定的冷凍速率降至零下某一溫度，?并在此溫度下對(duì)其長期保存的過程。?
復(fù)蘇則是將凍存的細(xì)胞系恢復(fù)到常溫的過程，?原則是“慢凍快融”，?以較大限度地保存細(xì)胞活力。?
細(xì)胞計(jì)數(shù)：?
制備細(xì)胞懸液，?使用消化單層培養(yǎng)細(xì)胞或收集懸浮培養(yǎng)細(xì)胞，?制成單個(gè)細(xì)胞懸液。?
在顯微鏡下，?用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格中的細(xì)胞數(shù)，?細(xì)胞壓中線時(shí)，?只計(jì)左側(cè)和上方者，?不計(jì)右側(cè)和下方者。?
熒光顯微鏡使用：?
使用熒光染料對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色，?并觀察細(xì)胞所發(fā)出的熒光信號(hào)，?以研究細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能。?
聚合酶鏈反應(yīng)（?PCR）?：?
準(zhǔn)備PCR反應(yīng)所需的DNA模板、?引物、?聚合酶和核苷酸。?
按照PCR反應(yīng)液配制表制備反應(yīng)液。?
在反應(yīng)器中加入反應(yīng)液，?開始PCR反應(yīng)。?
PCR反應(yīng)的成功與否，?可以通過電泳、?測序等方法進(jìn)一步確認(rèn)。?
轉(zhuǎn)染：?
準(zhǔn)備轉(zhuǎn)染所需的載體DNA和細(xì)胞。?
制備轉(zhuǎn)染試劑，?將DNA載體溶解于轉(zhuǎn)染試劑中，?與細(xì)胞混合均勻。?
處理轉(zhuǎn)染細(xì)胞，?并進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。?
在操作過程中，?應(yīng)注意實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)范，?避免隨意丟棄垃圾，?及時(shí)登記購買耗材或試劑，?保持實(shí)驗(yàn)環(huán)境的清潔和安全
下列是公司正在出售的產(chǎn)品：
BET抑制劑(GSK1324726A) | 血管緊張肽meiAELISA試劑盒 |
P450抑制劑（Clotrimazole） | Cereblon蛋白ELISA試劑盒 |
TLR 7激動(dòng)劑（GS-9620） | 順烏頭(ACO)活性比色法檢測試劑盒 |
CXCL8受體CXCR1/2變構(gòu)抑制劑（Reparixin） | 天冬合成（AS)活性比色法檢測試劑盒 |
β-內(nèi)酰胺酶抑制劑(Tazobactam) | 滑行蛋白βELISA試劑盒 |
STAT抑制劑（Nifuroxazide） | 肌球蛋白ⅩⅨELISA試劑盒 |
RNA polymerase抑制劑（T 705） | 雞mei(CA)試劑盒ELISA |
HIV非核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(Rilpivirine) | 人堿性成纖維細(xì)胞生長因子6(bFGF-6)檢測試劑盒elisa |
PknG抑制劑(AX20017) | 人脂聯(lián)su受體2(ADIPOR2)檢測試劑盒elisa |
DNA旋轉(zhuǎn)酶抑制劑(Marbofloxacin) | 大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒 |
錘頭核酶抑制劑(Framycetin) | 鼻氣管炎鳥桿菌PCR試劑盒 |
HBV抑制劑 | 唾液鏈球菌PCR試劑盒 |
HCV NS5B聚合酶抑制劑（VCH-916） | 狂犬病病毒街毒株PCR檢測試劑盒 |
HIV-1與細(xì)胞CD4受體結(jié)合抑制劑(BMS-663068) | RIPA裂解緩沖液(Western Blot)免疫檢測偶發(fā)分枝桿菌PCR檢測試劑盒 |
HIV-1逆轉(zhuǎn)錄抑制劑(Trovirdine) | 費(fèi)蘭杜病毒RT-PCR試劑盒 |
