RIPA裂解緩沖液(Western Blot)免疫檢測

商品屬性：

商品介紹：

對目的蛋白進(jìn)行檢測分析時，總蛋白的提取至關(guān)重要，如蛋白提取不好會導(dǎo)致后續(xù)試驗的不理想甚至失敗，如：信號極弱或無雜交信號、背景高、非特異性條帶多等.根據(jù)目標(biāo)蛋白的類型和實驗應(yīng)用種類來選擇合適的RIPA裂解液，才能大程度地保證后續(xù)實驗的成功。而RIPA Lysis Buffer For Western Blot對動物組織和細(xì)胞的裂解能力，它可以裂解細(xì)胞核和線粒體，并可提取到更多的膜蛋白，從而可獲得更多的總蛋白。因其強的裂解能力，使得大量的基因組DNA從細(xì)胞核中釋放出來，使蛋白變的十分粘稠，使用Benzonase核酸酶(貨號：MT0068)消化可有效解決。經(jīng)我司RIPA裂解液獲得得蛋白可用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度；使用Bradford法測定由本裂解液裂解所得到樣品的蛋白濃度會稍有誤差。

RIPA裂解緩沖液(Western Blot)

產(chǎn)品特點：

1．可以很好的裂解細(xì)胞膜及細(xì)胞核，從而更好的釋放胞漿蛋白、核蛋白和膜蛋白。

2．對于核蛋白，經(jīng)本品裂解后，核蛋白與粘稠的基因組DNA分離，離心后核蛋白存在于上清中，核蛋白的捕獲率高達(dá)90%。

3．對于膜蛋白，Western Blot RIPA Lysis Buffer可大程度的破壞細(xì)胞膜和變性蛋白，使蛋白與膜分離，防止蛋白與膜復(fù)合物在離心后沉淀，從而防止蛋白丟失。

4．在提取蛋白過程中，基因組DNA釋放使得蛋白提取液變的十分粘稠，使用Benzonase核酸酶消化可有效解決。

儲存條件：置于室溫陰涼處，可保存2年。

步驟和注意事項：?

準(zhǔn)備實驗環(huán)境：?確保實驗區(qū)域清潔，?使用酒精清潔計數(shù)板和蓋玻片，?然后用吸水紙輕輕擦干。?

細(xì)胞培養(yǎng)：?

準(zhǔn)備試管或培養(yǎng)皿、?細(xì)胞培養(yǎng)基和待培養(yǎng)的細(xì)胞。?

取出保存于低溫下的細(xì)胞苗，?并加入培養(yǎng)基中，?搖晃混合均勻。?

用移液管將細(xì)胞培養(yǎng)基和細(xì)胞種植在試管或培養(yǎng)皿中。?

將試管或培養(yǎng)皿放置于恒溫培養(yǎng)箱中，?定期更換培養(yǎng)液。?

細(xì)胞凍存與復(fù)蘇：?

細(xì)胞系的凍存是將生長較好的傳代細(xì)胞懸浮在加有冷凍保護(hù)劑的溶液中，?以一定的冷凍速率降至零下某一溫度，?并在此溫度下對其長期保存的過程。?

復(fù)蘇則是將凍存的細(xì)胞系恢復(fù)到常溫的過程，?原則是“慢凍快融”，?以較大限度地保存細(xì)胞活力。?

細(xì)胞計數(shù)：?

制備細(xì)胞懸液，?使用消化單層培養(yǎng)細(xì)胞或收集懸浮培養(yǎng)細(xì)胞，?制成單個細(xì)胞懸液。?

在顯微鏡下，?用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格中的細(xì)胞數(shù)，?細(xì)胞壓中線時，?只計左側(cè)和上方者，?不計右側(cè)和下方者。?

熒光顯微鏡使用：?

使用熒光染料對細(xì)胞進(jìn)行染色，?并觀察細(xì)胞所發(fā)出的熒光信號，?以研究細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能。?

聚合酶鏈反應(yīng)（?PCR）?：?

準(zhǔn)備PCR反應(yīng)所需的DNA模板、?引物、?聚合酶和核苷酸。?

按照PCR反應(yīng)液配制表制備反應(yīng)液。?

在反應(yīng)器中加入反應(yīng)液，?開始PCR反應(yīng)。?

PCR反應(yīng)的成功與否，?可以通過電泳、?測序等方法進(jìn)一步確認(rèn)。?

轉(zhuǎn)染：?

準(zhǔn)備轉(zhuǎn)染所需的載體DNA和細(xì)胞。?

制備轉(zhuǎn)染試劑，?將DNA載體溶解于轉(zhuǎn)染試劑中，?與細(xì)胞混合均勻。?

處理轉(zhuǎn)染細(xì)胞，?并進(jìn)行下一步實驗。?

在操作過程中，?應(yīng)注意實驗室安全規(guī)范，?避免隨意丟棄垃圾，?及時登記購買耗材或試劑，?保持實驗環(huán)境的清潔和安全

下列是公司正在出售的產(chǎn)品：