蛋白印跡膜再生液免疫檢測(cè)

商品屬性：

商品介紹：

產(chǎn)品保存：4℃保存，一年有效

產(chǎn)品說明：

蛋白印跡膜再生液，用于免疫印跡中轉(zhuǎn)移了蛋白后膜的重復(fù)利用。在免疫印跡中完成了一抗二抗結(jié)合和后續(xù)的化學(xué)發(fā)光檢測(cè)后，有時(shí)還需要檢測(cè)表達(dá)量相對(duì)穩(wěn)定的內(nèi)參蛋白作為參照，或檢測(cè)其它蛋白進(jìn)行比較。通過使用蛋白印跡膜再生液中特殊成份解離一抗二抗與印跡膜上抗原的結(jié)合從而去除一抗二抗，即可非常方便地重新利用同一張膜檢測(cè)其它蛋白。與重新跑一個(gè) SDS-PAGE 膠比較，不僅省時(shí)省力，而且可以消除重新上樣而帶來的誤差，使可比性更強(qiáng)。

產(chǎn)品特點(diǎn):

1.不含有常用的beta-巰基乙醇，室溫下使用，可對(duì)同一膜進(jìn)行 5次以上的免疫印跡檢測(cè).

2.獨(dú)的配方，效力強(qiáng)，對(duì)蛋白作用溫和。

使用方法：

1.用 TBS-T 將膜洗10分鐘×3次，將膜充分浸泡于適當(dāng)體積再生液中，搖床震蕩室溫孵育30－60分鐘(孵育時(shí)間視具體情況而定，表達(dá)量高的蛋白可適當(dāng)延長時(shí)間，表達(dá)量低的蛋白可減少時(shí)間)。

2.用鑷子取出膜，用 TBS-T洗滌緩沖液快速淋洗膜一次，然后洗膜 5-10分鐘。

3.此時(shí)膜上結(jié)合的抗體己被洗脫，可重新封閉，進(jìn)行下一輪抗體孵育。

注意事項(xiàng)：

1.剛從冷凍保存中拿出來會(huì)出現(xiàn) SDS的沉淀，建議溫水溶解再使用。

2.建議先檢測(cè)表達(dá)量較低的目的蛋白，用再生液處理后檢測(cè)表達(dá)量高的蛋白。

3.本品適用于 NC 膜和 PVDF 膜，推薦使用 PVDF 膜，效果更佳。

步驟和注意事項(xiàng)：?

準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)環(huán)境：?確保實(shí)驗(yàn)區(qū)域清潔，?使用酒精清潔計(jì)數(shù)板和蓋玻片，?然后用吸水紙輕輕擦干。?

細(xì)胞培養(yǎng)：?

準(zhǔn)備試管或培養(yǎng)皿、?細(xì)胞培養(yǎng)基和待培養(yǎng)的細(xì)胞。?

取出保存于低溫下的細(xì)胞苗，?并加入培養(yǎng)基中，?搖晃混合均勻。?

用移液管將細(xì)胞培養(yǎng)基和細(xì)胞種植在試管或培養(yǎng)皿中。?

將試管或培養(yǎng)皿放置于恒溫培養(yǎng)箱中，?定期更換培養(yǎng)液。?

細(xì)胞凍存與復(fù)蘇：?

細(xì)胞系的凍存是將生長較好的傳代細(xì)胞懸浮在加有冷凍保護(hù)劑的溶液中，?以一定的冷凍速率降至零下某一溫度，?并在此溫度下對(duì)其長期保存的過程。?

復(fù)蘇則是將凍存的細(xì)胞系恢復(fù)到常溫的過程，?原則是“慢凍快融”，?以較大限度地保存細(xì)胞活力。?

細(xì)胞計(jì)數(shù)：?

制備細(xì)胞懸液，?使用消化單層培養(yǎng)細(xì)胞或收集懸浮培養(yǎng)細(xì)胞，?制成單個(gè)細(xì)胞懸液。?

在顯微鏡下，?用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格中的細(xì)胞數(shù)，?細(xì)胞壓中線時(shí)，?只計(jì)左側(cè)和上方者，?不計(jì)右側(cè)和下方者。?

熒光顯微鏡使用：?

使用熒光染料對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色，?并觀察細(xì)胞所發(fā)出的熒光信號(hào)，?以研究細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能。?

聚合酶鏈反應(yīng)（?PCR）?：?

準(zhǔn)備PCR反應(yīng)所需的DNA模板、?引物、?聚合酶和核苷酸。?

按照PCR反應(yīng)液配制表制備反應(yīng)液。?

在反應(yīng)器中加入反應(yīng)液，?開始PCR反應(yīng)。?

PCR反應(yīng)的成功與否，?可以通過電泳、?測(cè)序等方法進(jìn)一步確認(rèn)。?

轉(zhuǎn)染：?

準(zhǔn)備轉(zhuǎn)染所需的載體DNA和細(xì)胞。?

制備轉(zhuǎn)染試劑，?將DNA載體溶解于轉(zhuǎn)染試劑中，?與細(xì)胞混合均勻。?

處理轉(zhuǎn)染細(xì)胞，?并進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。?

在操作過程中，?應(yīng)注意實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)范，?避免隨意丟棄垃圾，?及時(shí)登記購買耗材或試劑，?保持實(shí)驗(yàn)環(huán)境的清潔和安全

下列是公司正在出售的產(chǎn)品：