BCIP/NBT顯色試劑盒藍(lán)紫色(IHC)免疫檢測

商品介紹：

本試劑盒采用液體性滴瓶包裝，使用方便。5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸鹽（BCIP）/硝基四氮唑藍(lán)（NBT）是堿性磷酸酶的佳底物組合之一，BCIP在AP的催化下生成強(qiáng)反應(yīng)性深藍(lán)色產(chǎn)物，后者與氧化劑硝基四氮唑藍(lán)（NBT）反應(yīng)亦生成深藍(lán)色產(chǎn)物，從而進(jìn)一步增強(qiáng)了顯色，使之呈現(xiàn)鮮艷的藍(lán)紫色，廣泛用于組化實驗中的堿性磷酸酶顯色步驟。

商品屬性：

操作方法

1）堿性磷酸酶的檢測完成后，TBS充分洗滌，5min/次，共4次?！咀ⅰ浚翰坏檬褂昧姿猁}緩沖液。

2）按1ml 蒸餾水加1滴36301-A和1滴36301-B，混勻，加至標(biāo)本上。一般避光顯色10-30min。若無背景出現(xiàn)則可繼續(xù)顯色。直至顯色滿意為止。

3）蒸餾水充分洗滌以終止反應(yīng)。必要時核固紅復(fù)染。

4）封片劑封片，觀察。

儲存條件：-20℃，有效期一年。

步驟和注意事項：?

準(zhǔn)備實驗環(huán)境：?確保實驗區(qū)域清潔，?使用酒精清潔計數(shù)板和蓋玻片，?然后用吸水紙輕輕擦干。?

細(xì)胞培養(yǎng)：?

準(zhǔn)備試管或培養(yǎng)皿、?細(xì)胞培養(yǎng)基和待培養(yǎng)的細(xì)胞。?

取出保存于低溫下的細(xì)胞苗，?并加入培養(yǎng)基中，?搖晃混合均勻。?

用移液管將細(xì)胞培養(yǎng)基和細(xì)胞種植在試管或培養(yǎng)皿中。?

將試管或培養(yǎng)皿放置于恒溫培養(yǎng)箱中，?定期更換培養(yǎng)液。?

細(xì)胞凍存與復(fù)蘇：?

細(xì)胞系的凍存是將生長較好的傳代細(xì)胞懸浮在加有冷凍保護(hù)劑的溶液中，?以一定的冷凍速率降至零下某一溫度，?并在此溫度下對其長期保存的過程。?

復(fù)蘇則是將凍存的細(xì)胞系恢復(fù)到常溫的過程，?原則是“慢凍快融”，?以較大限度地保存細(xì)胞活力。?

細(xì)胞計數(shù)：?

制備細(xì)胞懸液，?使用消化單層培養(yǎng)細(xì)胞或收集懸浮培養(yǎng)細(xì)胞，?制成單個細(xì)胞懸液。?

在顯微鏡下，?用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格中的細(xì)胞數(shù)，?細(xì)胞壓中線時，?只計左側(cè)和上方者，?不計右側(cè)和下方者。?

熒光顯微鏡使用：?

使用熒光染料對細(xì)胞進(jìn)行染色，?并觀察細(xì)胞所發(fā)出的熒光信號，?以研究細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能。?

聚合酶鏈反應(yīng)（?PCR）?：?

準(zhǔn)備PCR反應(yīng)所需的DNA模板、?引物、?聚合酶和核苷酸。?

按照PCR反應(yīng)液配制表制備反應(yīng)液。?

在反應(yīng)器中加入反應(yīng)液，?開始PCR反應(yīng)。?

PCR反應(yīng)的成功與否，?可以通過電泳、?測序等方法進(jìn)一步確認(rèn)。?

轉(zhuǎn)染：?

準(zhǔn)備轉(zhuǎn)染所需的載體DNA和細(xì)胞。?

制備轉(zhuǎn)染試劑，?將DNA載體溶解于轉(zhuǎn)染試劑中，?與細(xì)胞混合均勻。?

處理轉(zhuǎn)染細(xì)胞，?并進(jìn)行下一步實驗。?

在操作過程中，?應(yīng)注意實驗室安全規(guī)范，?避免隨意丟棄垃圾，?及時登記購買耗材或試劑，?保持實驗環(huán)境的清潔和安全

下列是公司正在出售的產(chǎn)品：