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廣電計量檢測集團(tuán)股份有限公司

Cell Meter™熒光法脂肪酸攝取檢測試劑盒

參考價 3540
訂貨量 ≥1
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 公司名稱南京沃博生物科技有限公司
  • 品       牌其他品牌
  • 型       號36385
  • 所  在  地南京市
  • 廠商性質(zhì)生產(chǎn)廠家
  • 更新時間2024/6/20 8:38:50
  • 訪問次數(shù)516
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自主生化試劑品牌warbio已經(jīng)入駐多家高校平臺,先后入駐南京大學(xué),南京農(nóng)業(yè)大學(xué),東南大學(xué),西湖大學(xué),華南理工大學(xué),北京師范大學(xué),福建農(nóng)林大學(xué),北京庫巴扎,天津基理,上海至采信息采購平臺等公司秉持誠信經(jīng)營,為科研工作者提供更好的產(chǎn)品。專業(yè)代理銷售國內(nèi)外生命科學(xué)領(lǐng)域的產(chǎn)品以及warbio沃博生物常規(guī)生化試劑,公司長期以來與眾多國內(nèi)外廠家和多家專業(yè)代理銷售公司保持密切聯(lián)系、溝通與合作,擁有穩(wěn)定、有效的產(chǎn)品供應(yīng)渠道。公司長期以來以提供高質(zhì)量的產(chǎn)品、實惠的價格和優(yōu)質(zhì)的服務(wù)贏得客戶的好評,與多家高等院校、研究所、醫(yī)院、制藥企業(yè)等大型科研機(jī)構(gòu)建立長期穩(wěn)定的合作關(guān)系。
主要代理北京莊盟生物分子試劑,Abmart艾比瑪特抗體,美國Phytoteche一級代理,美國AATBIO細(xì)胞染料,安普未來恒溫擴(kuò)增試劑盒,英國TwistDx公司RPA等溫擴(kuò)增試劑盒,美國GLPBIO抑制劑,Tolobio吐露港生物  ,藥物發(fā)現(xiàn)一站式平臺 陶術(shù)生物Topscience等國外生命科學(xué)產(chǎn)品試劑耗材。



生物科生物科技技術(shù)開發(fā)、技術(shù)服務(wù)、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)咨詢;實驗室設(shè)備、化工原料及產(chǎn)品、機(jī)電設(shè)備、藥品、化妝品、包裝材料、實驗室耗材技技術(shù)開發(fā)、技術(shù)服務(wù)、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)咨詢;實驗室設(shè)備、化工原料及產(chǎn)品、機(jī)電設(shè)備、藥品、化妝品、包裝材料、實驗室耗材
產(chǎn)品規(guī)格 100 Tests 級別 超純、高純
Screen Quest™熒光脂肪酸攝取測定試劑盒為測量含有脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的細(xì)胞中的脂肪酸攝取提供了一種簡單而靈敏的方法。
Cell Meter™熒光法脂肪酸攝取檢測試劑盒 產(chǎn)品信息

攝取脂肪酸是治療許多人類疾?。ɡ绶逝职Y,2型糖尿病和肝脂肪變性)的重要治療目標(biāo)。Screen Quest™熒光脂肪酸攝取測定試劑盒為測量含有脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的細(xì)胞中的脂肪酸攝取提供了一種簡單而靈敏的方法。該套件使用專有的十二酸熒光脂肪酸底物??梢栽诰哂械撞孔x取模式或FITC通道的任何熒光酶標(biāo)儀上進(jìn)行此脂肪酸攝取測定試劑盒。該測定可以在96孔或384孔微量滴定板中以簡單的混合和讀取程序進(jìn)行,并且很容易適用于高通量篩選應(yīng)用。

平臺

熒光酶標(biāo)儀
激發(fā)485納米
發(fā)射515納米
隔斷495納米
推薦板黑墻/透明底
儀器規(guī)格底讀模式

組件

組分A:TF2-C12脂肪酸1小瓶,凍干
組分B:測定緩沖液1瓶(10毫升)
成分C:DMSO1小瓶(100 µL)

協(xié)議范例

乍看上去

協(xié)議摘要

  1. 平板細(xì)胞在生長培養(yǎng)基中4-6小時

  2. 將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至無血清培養(yǎng)基中1小時,然后根據(jù)需要處理細(xì)胞

  3. 添加100 µL /孔的脂肪酸上染溶液

  4. 立即監(jiān)測動力學(xué)在Ex / Em = 485/515 nm時的熒光增強(qiáng),或在孵育60分鐘后監(jiān)測終點(diǎn)讀數(shù)(底部讀數(shù)模式)

重要說明
開始實驗之前,請在室溫下解凍所有試劑盒組件。

儲備溶液的制備

除非另有說明,否則所有未使用的儲備溶液應(yīng)分為一次性使用的等分試樣,制備后應(yīng)儲存在-20°C下。避免重復(fù)凍融循環(huán)。

TF2-C12脂肪酸儲備溶液:
將20 µL DMSO(組分C)添加到TF2-C12脂肪酸(組分A)小瓶中,并充分混合。注意:20 µL的熒光脂肪酸底物儲備液足以裝一板。如果將試管緊密密封并避光,則可以將未使用的熒光脂肪酸底物原液分裝并在< -20 o C下保存兩個月。避免重復(fù)凍融循環(huán)。

準(zhǔn)備工作溶液

加載脂肪酸染料的溶液:
將20 µL TF2-C12脂肪酸儲備溶液添加到10 mL的測定緩沖液(組分B)中,并充分混合。注意:  10毫升脂肪酸染料上樣溶液足以裝滿一盤;為每個盤子準(zhǔn)備新鮮的食物并進(jìn)行實驗。

程序

細(xì)胞制備:

根據(jù)需要準(zhǔn)備細(xì)胞。以下方案是制備3T3-L1脂肪細(xì)胞的指南。

  • 準(zhǔn)備分化的3T3-L1脂肪細(xì)胞(參見參考文獻(xiàn)1):3T3-L1成纖維細(xì)胞在DMEM / FBS匯合后在75 cm燒瓶中培養(yǎng)2天,然后在補(bǔ)充有0.83 µM胰島素,0.25 µM的DMEM / FBS中培養(yǎng)2天。disaimisong和0.25 mM異丁基甲基huangpiaoling。更換培養(yǎng)基以維持disaimisong和IBMX不在另外2天的胰島素濃度。然后將培養(yǎng)基更換為單獨(dú)的DMEM / FBS,持續(xù)3-5天。在分化誘導(dǎo)后的第8至12天使用分化的細(xì)胞(其中至少95%通過脂質(zhì)液滴的積累顯示出脂肪細(xì)胞表型)。

  • 在生長培養(yǎng)基中以50,000-80,000個細(xì)胞/孔/ 100 µL / 96孔或12,500-20,000個細(xì)胞/孔/ 25 µL / 384孔黑墻/透明底部細(xì)胞培養(yǎng)板接種3T3-L1脂肪細(xì)胞,用Poly-D賴氨酸板固定4個實驗前-6小時。斷開制動器,以800 rpm的速度離心板2分鐘。 注意:建議將3個僅含生長培養(yǎng)基的孔(無細(xì)胞)平板作為空白孔進(jìn)行數(shù)據(jù)歸一化。 注意:我們發(fā)現(xiàn)在同一天(4-6小時,然后血清被剝奪1小時)接種的脂肪細(xì)胞比接種過夜的脂肪細(xì)胞效果更好。

  • 從培養(yǎng)箱中取出細(xì)胞板,從孔中吸出培養(yǎng)基,并用90 µL /孔/ 96孔板或20 µL /孔/ 384孔板的無血清培養(yǎng)基剝奪細(xì)胞。將細(xì)胞在37oC,5%CO 2培養(yǎng)箱中孵育1小時。

  • 通過添加10 µL /孔/ 96孔板(5 µL /孔/ 384孔板)或1X Hanks和20 mM Hepes緩沖液(1X HBSS,pH 7.4)或您選擇的緩沖液來處理細(xì)胞復(fù)合稀釋劑。對于空白孔,添加化合物稀釋劑。將細(xì)胞在37℃,5%CO 2培養(yǎng)箱中孵育所需的時間(對于用胰島素處理的3T3-L1細(xì)胞,則需要30分鐘)。

樣本協(xié)議:

  1. 根據(jù)需要用測試化合物處理細(xì)胞。

  2. 從培養(yǎng)箱中取出經(jīng)過化合物處理的細(xì)胞板,添加100 µL /孔(96孔板)或25 µL /孔(384孔板)(包括空白孔)的脂肪酸染料上載溶液。

  3. 使用底部讀取模式,使用熒光酶標(biāo)儀在Ex / Em = 485/515 nm(在495 nm處截止)下測量熒光信號。注意:對于動態(tài)讀數(shù):以20秒的間隔立即讀取熒光強(qiáng)度,持續(xù)30-60分鐘。注意:對于終點(diǎn)讀數(shù):在30-60分鐘孵育結(jié)束時讀取熒光強(qiáng)度。


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