注意事項(xiàng)：
1. 本試劑盒的檢測(cè)試劑中含有螢光素酶，反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致其逐漸失活。盡管經(jīng)測(cè)試本試劑反復(fù)凍融5次對(duì)于其檢測(cè)效果無(wú)顯著影響，為取得良好的使用效果，*次解凍后可適當(dāng)分裝保存。反復(fù)凍融過(guò)程中，可能會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)試劑中出現(xiàn)少量沉淀，此時(shí)宜平衡至室溫，并盡量溶解。如仍有殘留的不溶物，可以離心去除后使用，經(jīng)測(cè)試不會(huì)影響后續(xù)的檢測(cè)效果。
2. 檢測(cè)時(shí)需使用白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板，相鄰孔之間會(huì)產(chǎn)生相互干擾。
3. CCK-8法細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明中提供了檢測(cè)ATP標(biāo)準(zhǔn)品的方法，實(shí)際檢測(cè)細(xì)胞活力時(shí)通常并不需要檢測(cè)ATP標(biāo)準(zhǔn)品。
操作方法
1. 96 孔板加入細(xì)胞100μL/孔（約1×104），置37℃ 5%CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24 小時(shí)。2.加入適當(dāng)濃度的受試化合物。3.將96 孔板在37℃，含5% CO2 空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4. 向各孔中加入10 μl 的新型細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)溶液。
5. 37℃下孵育1～4 小時(shí)。
6. 酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度。
結(jié)果分析
1. 細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（培養(yǎng)基加新型細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)溶液，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加新型細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)溶液，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
2. 求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | CCK-8法細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒 | 貨號(hào) | CS-C6089 |
英文名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 規(guī)格 | 500T |
此試劑盒是用于測(cè)定細(xì)胞增殖或毒性試驗(yàn)中活細(xì)胞數(shù)目的一種高靈敏度，無(wú)放射性的比色檢測(cè)法。實(shí)驗(yàn)的靈敏度比其它如MTT, XTT 或MTS 高。由于新型細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)溶液相當(dāng)穩(wěn)定，并且對(duì)細(xì)胞沒(méi)有毒性，可直接加入到細(xì)胞樣品中長(zhǎng)時(shí)間孵育。
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細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；
②生物膜與細(xì)胞器的研究；
③細(xì)胞骨架體系的研究；
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；
⑧細(xì)胞工程.
細(xì)胞生物學(xué)研究的常用技術(shù)有哪些：
1.顯微技術(shù)：包括顯微觀察,顯微操作.
2細(xì)胞組分分析技術(shù)：離心分離技術(shù),生物大分子定位技術(shù),定量細(xì)胞化學(xué)分析技術(shù).
3.細(xì)胞工程：細(xì)胞培養(yǎng)。
