細(xì)胞電融合/電穿孔儀ECM2001是一臺(tái)萬能的細(xì)胞操作儀器，它綜合了電穿孔儀和電融合儀的特點(diǎn)，ECM2001在細(xì)胞融合時(shí)，分三個(gè)階段，預(yù)融合、融合、后融合階段．ECM2001在預(yù)融合時(shí)可產(chǎn)生一種*的高頻交流波，交流波將細(xì)胞排列成雙體或株璉，以便融合的進(jìn)行，提高了融合的效率。
融合階段：交流波和直流波的轉(zhuǎn)換之間設(shè)有微秒開關(guān)，能在極短時(shí)間內(nèi)從交流電轉(zhuǎn)成直流電。在方波長電波的作用下，使細(xì)胞高效融合，融合完成：ECM2001立即產(chǎn)生了低電壓的交流波可使已初步融合的細(xì)胞聚集在一起，完成細(xì)胞圓體程序。
當(dāng)轉(zhuǎn)基因向?qū)Я餍枰^高的電壓和較長的脈沖時(shí)，直流方波長脈沖可單獨(dú)使用，完成轉(zhuǎn)基因。
細(xì)胞電融合/電穿孔儀技術(shù)參數(shù)
交流參數(shù)：*非正弦波形
頻率：1MHZ
電壓：0-75V
持續(xù)時(shí)間：0-99秒
直流參數(shù)：方波型
高壓模式：10-3000V/10 V調(diào)進(jìn) --用于電穿孔及轉(zhuǎn)基因；
脈沖次數(shù)：1-99次
應(yīng)用舉例
• 胚胎操作/核移植/動(dòng)物克隆 （系統(tǒng)：ECM2001/830）
核移植是將細(xì)胞核從供體轉(zhuǎn)入受體的過程。細(xì)胞核指導(dǎo)胚胎的發(fā)育，導(dǎo)致新生體安全出生?；罴?xì)胞分裂，形成胚胎。Meng等人（1997）將核移植技術(shù)擴(kuò)展至靈長類動(dòng)物模型，克隆出恒河猴。技術(shù)的進(jìn)步使研究人員能夠從分裂球進(jìn)展至更高分化的胚胎細(xì)胞以及靜止的胚兒細(xì)胞，作為核的供應(yīng)來源。胚胎產(chǎn)生的細(xì)胞在體外培養(yǎng)6-13代，然后在轉(zhuǎn)入前使用血清饑餓的方法使細(xì)胞靜止。如前文所述，Roble、Cibelli以及Stice是第一次在1998年報(bào)告使用非老化胚成纖維細(xì)胞作為核的供體進(jìn)行核移植而產(chǎn)生綿羊克隆轉(zhuǎn)基因牛的人。IanWilmut在1996年震驚了整個(gè)世界，他從成年乳腺的細(xì)胞產(chǎn)生出第一個(gè)動(dòng)物克隆——多利。使用分化的成年細(xì)胞進(jìn)行克隆的能力打開了核移植廣泛運(yùn)用的大門即基因治療的令人激動(dòng)的模式。最近的成功事例PPLTherapeutics公司從成年體細(xì)胞克隆出豬。對(duì)于這些用途可以使用多種細(xì)胞融合樣品池及微型載玻片。
• 動(dòng)物細(xì)胞融合 （系統(tǒng)：ECM2001）
腫瘤及樹突的電融合目前在過繼性免疫療法中進(jìn)行使用。腫瘤細(xì)胞本身不能作為良好的抗原提成細(xì)胞，因此不會(huì)刺激T細(xì)胞生長。樹突細(xì)胞是已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的*抗原提呈細(xì)胞，在融合后可以將腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)變成抗原提呈細(xì)胞。刺激后比未融合腫瘤細(xì)胞至少增加100倍。對(duì)于這些用途可以使用多種細(xì)胞融合附件及微型載玻片。
• 雜交瘤/細(xì)胞雜交瘤技術(shù) （系統(tǒng)：ECM2001）
在過去十年中，使用電融合技術(shù)進(jìn)行雜交瘤的產(chǎn)生及抗體大大增加。電融合的過程可以通過顯微鏡進(jìn)行觀察，與PEG相比需要的細(xì)胞數(shù)量較少。使用電融合用于這種用途還有無毒性及高效性的優(yōu)點(diǎn)。
Panova等人（1995）通過把人類B細(xì)胞與Heteromyeloma、Spam-8細(xì)胞進(jìn)行電融合增強(qiáng)了人類雜交瘤的生成。Kreutz等人（1998）引入了一種使用電融合及FACS分選的新方法產(chǎn)生細(xì)胞雜交瘤。Cao等人（1995）建立了另一種快速非選擇性方法通過電融合產(chǎn)生人類細(xì)胞雜交瘤。數(shù)據(jù)明確支持電融合用于這種重要目的的有效性。對(duì)于這些用途可以使用多種細(xì)胞融合附件及微型載玻片。
• 植物原生質(zhì)的融合 （系統(tǒng)：ECM2001）
電融合可被用于融合植物原生質(zhì)以產(chǎn)生雜交體及創(chuàng)造具有所需特性的作物。Hofmann-Tsay等人（1994）試驗(yàn)了可以的融合促進(jìn)物質(zhì)，發(fā)現(xiàn)一些多聚物可以便利融合過程而不影響細(xì)胞新生。Chen等人（1995）將原生質(zhì)從2種種屬的Porphyria進(jìn)行融合，成功率高達(dá)85%。這些鼓舞人心的數(shù)生質(zhì)從2種種屬的Porphyria進(jìn)行融合，成功率高達(dá)85%。這些鼓舞人心的數(shù)據(jù)提示電融合與傳統(tǒng)的PEG融合方法相比，可以改善融合效率以及可重復(fù)性。對(duì)于這些用途可以使用多種細(xì)胞融合附件及微型載玻片。
