實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招：
1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3、以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性，P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑，P／N小于1．5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對(duì)照，與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求：
① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封，放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。
② 與水蒸氣，水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封，并遠(yuǎn)離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑，應(yīng)將其固體或晶體密封保存，不宜長期存放其水溶液，亞硫酸，氫硫酸溶液要密封存放，鉀，鈉，白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存，其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng)，所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封，放于陰涼通風(fēng)處保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測,7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號(hào) |
土壤羥胺還原酶（HR）測試盒可見分光光度法 | 50管/24樣 | 可見分光光度法 | BK-01S6871 |
商品介紹：
測定意義: 土壤羥胺還原酶能將土壤中氮代謝過程中形成的中間產(chǎn)物羥胺還原為氨，土壤中的還原態(tài)化合物可作為氫的供體，其強(qiáng)弱影響到土壤氮代謝過程中氮素的氨揮發(fā)損失，間接影響氮肥的利用效率。 測定原理 硫酸鐵銨中的Fe3+可將羥胺氧化為氮?dú)?，自身被還原為Fe2+，Fe2+在弱酸條件下與鄰菲羅琳形成橙紅色配合物，在510nm處有吸收峰，羥胺還原酶作用于羥胺，使配合物形成量減少，510nm處吸光值的減少可反映羥胺還原酶的活性。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 天平、常溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、1 mL玻璃比色皿/96孔板、震蕩儀、氮吹儀。 |
試劑組成和配制:
提取液：液體 100 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體 5 mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑二：液體 15 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑三：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑四：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
操作步驟：
1. 樣品的準(zhǔn)備：
a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備：收集細(xì)胞，用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心，取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準(zhǔn)備：動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ，含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例， 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心，取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒（P1511）測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會(huì)比較大，該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量，用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如，小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定，可以冰浴保存；如果當(dāng)天不能完成測定，可以-70 ℃凍存，但建議盡量當(dāng)天完成測定。
2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作：
a. WST-8酶工作液的配制： 參照下表，根據(jù)待檢測樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量，配制適量WST-8酶工作液，配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存，可當(dāng)天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意：由于酶溶液的用量較少且易沉降，必須注意在使用前先輕輕離心一下，然后適當(dāng)混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動(dòng)工作液配制：將試劑盒提供的反應(yīng)啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻，按1μl 反應(yīng)啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進(jìn)行稀釋，即為反應(yīng)啟動(dòng)工作液。4℃或冰浴保存，可當(dāng)天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備：需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品，用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度：20U/ml，10U/ml ，5U/ml，2.5U/ml，1.25U/ml，0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升，參考樣品進(jìn)行檢測。說明：為避免稀釋后SOD酶活性的下降， SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用；本試劑盒對(duì)于SOD的檢測并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品，但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對(duì)照或作為對(duì)SOD活性定量的參考。
5g 蘇丹Ⅲ Sudan Ⅲ 室溫保存
50T 玉米MON810 PCR檢測試劑盒 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
15次 植物線粒體純化試劑盒 Plant Mitochondria Purification Kit 常溫保存
100mL HEPPS Buffer,0.2M,pH8.5 HEPPS Buffer,0.2M,pH8.5 常溫保存
0.5mL 探針標(biāo)記專用PCR Mix
2 ug pLOX-TERT-iresTK pLOX-TERT-iresTK 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
根瘤菌 250g
1瓶 NCI-H157細(xì)胞株 NCI-H157 低溫運(yùn)輸和保存
SOC SOC Medium 250g
2mg Aprotinin 4℃保存
1000mL Tris Buffered Saline(TBS),20X Tris Buffered Saline(TBS),20X 常溫保存
土壤羥胺還原酶（HR）測試盒可見分光光度法LSP1 白細(xì)胞F肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
PAR4 蛋白激活受體4抗體 規(guī)格: 0.2ml
Mouse Anti-Bov IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的小鼠抗牛IgG 規(guī)格: 0.1mlKLHL26 Kelch樣蛋白26抗體 規(guī)格: 0.2ml
TFR2/Transferrin Receptor 2 轉(zhuǎn)鐵蛋白受體2抗體 規(guī)格: 0.2mlHOXB5 同源盒蛋白HOXB5抗體 規(guī)格: 0.1ml
SOX9/SRA1 轉(zhuǎn)錄因子SOX9蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlTULP2/CT65/Cancer testis antigen 65 瘤/睪抗原65 規(guī)格: 0.2ml
ERK4 細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激4抗體 規(guī)格: 0.1mlAngiotensin II type 1A receptor 管緊張素Ⅱ1A型受體抗體 規(guī)格: 0.1ml
CCL16/HCC-4 巨噬細(xì)胞性蛋白16抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-mouse IgG/FITC FITC標(biāo)記的兔抗小鼠IgG 規(guī)格: 0.3ml
KCTD5 鉀離子通道四聚體結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體 規(guī)格: 0.2mlStanniocalcin 1 斯鈣素抗體 規(guī)格: 0.1ml
PI3K/PI3 kinase p85 alpha subunit 磷脂酰肌醇激抗體 規(guī)格: 0.1mlTRIM7/RNF90 糖原生成素相互作用蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
HBV pre S1/S2 protein 人乙肝毒pre S1/S2蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlDUSP13 雙特異性磷酸13抗體 規(guī)格: 0.2ml
MST4 絲/蘇蛋白激MST4抗體 規(guī)格: 0.2mlBMP2 骨形態(tài)發(fā)生蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml
PASK/STK39 絲/蘇蛋白激39抗體 0.2mlYB1 y-盒結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml
