產(chǎn)品優(yōu)勢
1.專為流式檢測設(shè)計的大斯托克斯位移染料
2.即用型配方,標記過程無需純化
產(chǎn)品概述
ReadiLink Rapid mFluor 780 抗體提供了一種以微觀方式標記抗體的方法。該試劑盒僅需要兩個簡單的混合步驟而無需純化步驟。 試劑盒中使用的iFluor 和mFluor 染料的琥珀酰亞胺酯(SE)顯示出與蛋白質(zhì)的脂族胺的良好反應(yīng)性和選擇性,并形成羧酰胺鍵,其與天然肽鍵相同且穩(wěn)定。 iFluor 和mFluor-抗體綴合物可用于免疫熒光染色,熒光原位雜交,流式細胞術(shù)和其他生物學(xué)應(yīng)用。 每個ReadiLink 抗體標記試劑盒都提供了進行兩次偶聯(lián)反應(yīng)(2x50μg蛋白質(zhì))的所有必需成分。 每個試劑盒可用于標記50-100μg單克隆,多克隆抗體或其他蛋白質(zhì)(> 10 kDa),只需兩個簡單的混合步驟??贵w標記試劑盒ReadiLink Rapid mFluor 780 抗體是美國AAT Bioquest研發(fā)的產(chǎn)品。
注:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其它非科研用途!
百螢生物簡介
西安百螢生物科技有限公司是一家專注從事生物、化學(xué)試劑及其試劑盒的;主要以熒光探針,分子探針,核酸/蛋白質(zhì)標記、細胞檢測等技術(shù)和產(chǎn)品為研發(fā)核心,產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于基因合成、細胞檢測、活體示蹤,抗體標記、新藥篩選等領(lǐng)域。
美國AAT Bioquest公司長年以來百螢生物與AAT Bioquest互補優(yōu)勢,為國內(nèi)外廣大用戶提供光譜檢測,底物顯色,熒光發(fā)光技術(shù)等全系列解決方案。近年來,百螢生物已與全球多家藥企、CRO公司、眾多高校及科研單位建立了長期穩(wěn)定的合作關(guān)系;我們的服務(wù)宗旨:為廣大科研用戶提供好的服務(wù);主要分為以下幾個產(chǎn)品線:
開發(fā)和生產(chǎn)熒光標記探針和發(fā)光探針。這些熒光標記探針和發(fā)光探針是用于標記生物大分子例如,蛋白質(zhì),核酸,碳水化合物的主要工具;
檢測蛋白質(zhì),核酸和活細胞熒光和熒光探針;
新型各種酶活性熒光探針和發(fā)光探針(特別是用與研究蛋白酶,蛋白激酶和氧化還原酶熒光標記探針和發(fā)光探針);
開發(fā)用于分子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)研究試劑和試劑盒;
生物鈣膜電位探針和神經(jīng)生物學(xué)熒光標記探針和發(fā)光探針;
標準操作規(guī)程(標記50μg蛋白質(zhì))
將所有組分加熱并在打開前將樣品瓶短暫離心,并在開始結(jié)合前準備所需的溶液。 以下SOP是標記抗HDAC IgG抗體的實例。
1.準備蛋白質(zhì)溶液(溶液A):
為了標記50g蛋白質(zhì)(假設(shè)目標蛋白質(zhì)濃度為1mg / mL),將5L(總反應(yīng)體積的10%)的反應(yīng)緩沖液(組分B)與50L目標蛋白質(zhì)溶液混合。
注1.如果您的蛋白質(zhì)濃度不同,請相應(yīng)調(diào)整蛋白質(zhì)體積,使~50μg蛋白質(zhì)可用于標記反應(yīng)。
注2:為了標記100g蛋白質(zhì)(假設(shè)目標蛋白質(zhì)濃度為1mg / mL),將10μL(總反應(yīng)體積的10%)反應(yīng)緩沖液(組分B)與100μL目標蛋白質(zhì)溶液混合。
注3:蛋白質(zhì)應(yīng)溶解于pH7.2-7.4的1X磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)中;如果蛋白質(zhì)溶解在甘an酸緩沖液中,必須用1X PBS(pH 7.2-7.4)透析,或使用Amicon Ultra-0.5超濾管,Ultracel-10超濾膜,10 kDa(來自Millipore的cat#UFC501008)去除用于蛋白質(zhì)沉淀的游離胺或銨鹽(如硫酸銨和乙酸銨)。
注4:不純的抗體、穩(wěn)定的牛血清蛋白(BSA)抗體或明膠不會被很好的標記。
注5:如果蛋白質(zhì)濃度小于1 mg / mL,則結(jié)合效率會降低。為獲得標記效率,建議蛋白質(zhì)濃度范圍為1-2 mg / mL。
2.運行結(jié)合反應(yīng):
2.1將蛋白質(zhì)溶液(溶液A)加入到一瓶標記染料(組分A)中,通過反復(fù)移液幾次將其混合均勻,或?qū)⑿∑繙u旋幾秒鐘。
注意:如果要標記100 µg蛋白質(zhì),請使用兩個小瓶(組分A),將100 µg蛋白質(zhì)分成2 x 50 µg蛋白質(zhì),并使每個50 µg蛋白質(zhì)與一小瓶標記染料反應(yīng),然后合并兩個小瓶,用于下一步。
2.2將綴合反應(yīng)混合物在室溫下保持30-60分鐘。
注意:如果需要,可以旋轉(zhuǎn)或搖動綴合反應(yīng)混合物更長的時間。
3.停止共軛反應(yīng):
3.1加入5 µL TQ染色淬滅緩沖液(組分C)(對于50 µg蛋白質(zhì))或加入10 µL TQ染色淬滅緩沖液(組分C)(對于100 µg蛋白質(zhì))。加入的緩沖液是總反應(yīng)體積的10%。
3.2在室溫下孵育10分鐘。
3.3標記的蛋白質(zhì)(抗體)完成。