ReadiLink iFluor 594抗體標(biāo)記試劑盒(標(biāo)記50ug抗體)
產(chǎn)品基本資料
產(chǎn)品名稱:ReadiLink iFluor 594蛋白標(biāo)記試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào):1230
產(chǎn)品規(guī)格:2 Labelings
儲(chǔ)存條件:在零下15度以下保存, 避免光照
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
1.標(biāo)記能力:可標(biāo)記約 2×50 µg 抗體(每管 iFluor® 594 染料標(biāo)記 50 µg 抗體)
2.適用對(duì)象:適用于單克隆抗體、多克隆抗體或其他分子量 >10 kDa 的蛋白質(zhì)
3.便捷性:提供完整的標(biāo)記組分,操作流程簡(jiǎn)單高效
產(chǎn)品概述
ReadiLink iFluor 594抗體標(biāo)記試劑盒提供了一種以微觀方式標(biāo)記抗體的便捷方法。該試劑盒僅需要兩個(gè)簡(jiǎn)單的混合步驟而無需純化步驟。 試劑盒中使用的iFluor 和mFluor 染料的琥珀酰亞胺酯(SE)顯示出與蛋白質(zhì)的脂族胺的良好反應(yīng)性和選擇性,并形成羧酰胺鍵,其與天然肽鍵相同且穩(wěn)定。iFluor 和mFluor-抗體綴合物可用于免疫熒光染色,熒光原位雜交,流式細(xì)胞術(shù)和其他生物學(xué)應(yīng)用。 每個(gè)ReadiLink 抗體標(biāo)記試劑盒都提供了進(jìn)行兩次偶聯(lián)反應(yīng)(2x50μg蛋白質(zhì))的所有必需成分。 每個(gè)試劑盒可用于標(biāo)記50-100μg單克隆,多克隆抗體或其他蛋白質(zhì)(> 10 kDa),只需兩個(gè)簡(jiǎn)單的混合步驟。ReadiLink iFluor 594抗體標(biāo)記試劑盒是美國(guó)AAT Bioquest研發(fā)的產(chǎn)品。
注:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其它非科研用途!
百螢生物簡(jiǎn)介
西安百螢生物科技有限公司是一家專注從事生物、化學(xué)試劑及其試劑盒的;主要以熒光探針,分子探針,核酸/蛋白質(zhì)標(biāo)記、細(xì)胞檢測(cè)等技術(shù)和產(chǎn)品為研發(fā)核心,產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于基因合成、細(xì)胞檢測(cè)、活體示蹤,抗體標(biāo)記、新藥篩選等領(lǐng)域。
美國(guó)AAT Bioquest公司長(zhǎng)年以來百螢生物與AAT Bioquest互補(bǔ)優(yōu)勢(shì),為國(guó)內(nèi)外廣大用戶提供光譜檢測(cè),底物顯色,熒光發(fā)光技術(shù)等全系列解決方案。近年來,百螢生物已與全球多家藥企、CRO公司、眾多高校及科研單位建立了長(zhǎng)期穩(wěn)定的合作關(guān)系;我們的服務(wù)宗旨:為廣大科研用戶提供好的服務(wù);主要分為以下幾個(gè)產(chǎn)品線:
開發(fā)和生產(chǎn)熒光標(biāo)記探針和發(fā)光探針。這些熒光標(biāo)記探針和發(fā)光探針是用于標(biāo)記生物大分子例如,蛋白質(zhì),核酸,碳水化合物的主要工具;
檢測(cè)蛋白質(zhì),核酸和活細(xì)胞熒光和熒光探針;
新型各種酶活性熒光探針和發(fā)光探針(特別是用與研究蛋白酶,蛋白激酶和氧化還原酶熒光標(biāo)記探針和發(fā)光探針);
開發(fā)用于分子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)研究試劑和試劑盒;
生物鈣膜電位探針和神經(jīng)生物學(xué)熒光標(biāo)記探針和發(fā)光探針;
標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(標(biāo)記50μg蛋白質(zhì))
將所有組分加熱并在打開前將樣品瓶短暫離心,并在開始結(jié)合前立即準(zhǔn)備所需的溶液。 以下SOP是標(biāo)記抗HDAC IgG抗體的實(shí)例。
1.準(zhǔn)備蛋白質(zhì)溶液(溶液A):
為了標(biāo)記50g蛋白質(zhì)(假設(shè)目標(biāo)蛋白質(zhì)濃度為1mg / mL),將5L(總反應(yīng)體積的10%)的反應(yīng)緩沖液(組分B)與50L目標(biāo)蛋白質(zhì)溶液混合。
注1.如果您的蛋白質(zhì)濃度不同,請(qǐng)相應(yīng)調(diào)整蛋白質(zhì)體積,使~50μg蛋白質(zhì)可用于標(biāo)記反應(yīng)。
注2:為了標(biāo)記100g蛋白質(zhì)(假設(shè)目標(biāo)蛋白質(zhì)濃度為1mg / mL),將10μL(總反應(yīng)體積的10%)反應(yīng)緩沖液(組分B)與100μL目標(biāo)蛋白質(zhì)溶液混合。
注3:蛋白質(zhì)應(yīng)溶解于pH7.2-7.4的1X磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)中;如果蛋白質(zhì)溶解在甘an酸緩沖液中,必須用1X PBS(pH 7.2-7.4)透析,或使用Amicon Ultra-0.5,Ultracel-10膜,10 kDa(來自Millipore的cat#UFC501008)去除廣泛用于蛋白質(zhì)沉淀的游離胺或銨鹽(如硫酸銨和乙酸銨)。
注4:不純的抗體、穩(wěn)定的牛血清蛋白(BSA)抗體或明膠不會(huì)被很好的標(biāo)記。疊d化鈉或硫柳汞的存在也可能干擾綴合反應(yīng)??梢酝ㄟ^透析或旋轉(zhuǎn)柱除去疊d化鈉或硫柳汞,以獲得標(biāo)記結(jié)果。
注5:如果蛋白質(zhì)濃度小于1 mg / mL,則結(jié)合效率顯著降低。為獲得標(biāo)記效率,建議終蛋白質(zhì)濃度范圍為1-2 mg / mL。
2.運(yùn)行結(jié)合反應(yīng):
2.1將蛋白質(zhì)溶液(溶液A)加入一瓶標(biāo)記染料(組分A)中,通過反復(fù)移液幾次將其混合均勻,或?qū)⑿∑繙u旋幾秒鐘。
注意:使用標(biāo)記染料的兩個(gè)小瓶(組分A)通過將100μg蛋白質(zhì)分成2x50μg蛋白質(zhì)并使每個(gè)50μg蛋白質(zhì)與一小瓶標(biāo)記染料反應(yīng)來標(biāo)記100μg蛋白質(zhì)。 將兩個(gè)小瓶合并用于下一步。
2.2將綴合反應(yīng)混合物在室溫下保持30-60分鐘。
注意:如果需要,可以旋轉(zhuǎn)或搖動(dòng)綴合反應(yīng)混合物更長(zhǎng)的時(shí)間。
3.停止共軛反應(yīng):
3.1添加5 L(對(duì)于50μg蛋白質(zhì))或10L(對(duì)于100μg蛋白質(zhì)),其為TQ染色猝滅緩沖液(組分C)的總反應(yīng)體積的10%到綴合反應(yīng)混合物中(來自步驟2.2),將它們混合 好。
3.2在室溫下孵育10分鐘。
3.3標(biāo)記的蛋白質(zhì)(抗體)現(xiàn)在可以使用了。