- 簡(jiǎn)介
Protein Maker是美國Protein Biosolutions公司研發(fā)的高通量蛋白純化系統(tǒng)。該系統(tǒng)解決了目前蛋白純化的瓶頸，可同時(shí)進(jìn)行24個(gè)蛋白樣品的純化實(shí)驗(yàn)，具有高通量，全自動(dòng)，可編程等特點(diǎn)，滿足不同用戶對(duì)于不同類型蛋白的純化要求。
Protein Maker高通量蛋白純化系統(tǒng)可添加24個(gè)獨(dú)立的純化柱，每一個(gè)都有自己的緩沖液體系（平衡緩沖液A，洗滌緩沖液B，洗脫緩沖液和水）。Protein Maker結(jié)合24個(gè)精密的注射泵，每一個(gè)注射泵都有9個(gè)通路，可以實(shí)現(xiàn)不同緩沖液吸棄和快速切換。
Protein Maker高通量蛋白純化系統(tǒng)具有24個(gè)高分辨的UV檢測(cè)器，能夠幫助研究人員判定蛋白的洗脫效果，確定蛋白的種類并進(jìn)行蛋白的精確定量。
板架上有20個(gè)位置，用于放置SBS板或架?？梢杂糜跇悠返难b載，也可用于專用洗滌緩沖液等的載入。
圖2：Protein Maker板架
適用于高通量蛋白質(zhì)組學(xué)實(shí)驗(yàn)室中蛋白純化
· 平行蛋白色譜法
· 24個(gè)平行的純化
–Production Mode（24個(gè)不同的蛋白樣品，1種類型的色譜柱
– Scouting Mode(24個(gè)不同的色譜柱，一種蛋白樣品）
–Complex Purification Mode（多步純化）
· 可以運(yùn)行24個(gè)色譜柱（0.1~10mL）
· 全自動(dòng)操作
· 廣泛的樣本容量—0.5mL到250mL樣本容量
· 自定義應(yīng)用程序
Protein Maker™軟件和使用界面（下圖）
點(diǎn)擊用戶界面允許操作者選擇不同的柱或改變參數(shù)用于自動(dòng)化的操作，也可以進(jìn)行手動(dòng)的抽吸和分配操作。從開始到結(jié)束，Protein Maker™運(yùn)行24個(gè)不同的1mL柱需要大約一小時(shí)。其中包括個(gè)別調(diào)整反應(yīng)梯度（開始時(shí)輸入24-10mL蛋白樣品）
· 選擇操作方法和循環(huán)數(shù)
· 設(shè)置每一次操作的流量
· 選擇平衡和洗滌的循環(huán)數(shù)
· 設(shè)置每一板的體積和洗滌劑的組分
· *自動(dòng)化的控制每一個(gè)泵、閥門和管架的位置
應(yīng)用
? 250mL初始體積中進(jìn)行抗體純化（蛋白A親和色譜法）
? 使用免疫損耗樹脂進(jìn)行質(zhì)譜檢測(cè)中樣品的準(zhǔn)備和生物標(biāo)記物的發(fā)現(xiàn)（血漿和腦脊髓液）
? (表面)誘導(dǎo)蛋白構(gòu)建的平行表達(dá)和純化檢測(cè)( Ni-chelate chromatography)
? 24蛋白質(zhì)樣品可以平行處理,蛋白質(zhì)產(chǎn)量可以足夠用于大量的分析實(shí)驗(yàn)
圖4：使用Protein Maker應(yīng)用全自動(dòng)兩步IMAC純化模式純化的蛋白進(jìn)行SDS-PAGE分析。
圖5： 樣品從粗E.coli重提取，包括His6x-tagged重組蛋白，通過6個(gè)單獨(dú)的IMAC柱同時(shí)運(yùn)行兩次（頂部）。Protein Maker™平行運(yùn)行的12種不同的蛋白突變的SDS-PAGE分析。從純化的蛋白中發(fā)現(xiàn)兩種新的結(jié)晶形式（低于200次的結(jié)晶實(shí)驗(yàn)）（底部）。
