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氮代謝系列_亞硝酸還原酶(NiR)測試盒

參  考  價(jià):面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)100管/48樣

品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所在地上海市

更新時(shí)間:2022-07-29 17:04:35瀏覽次數(shù):981次

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品牌 紀(jì)寧生物 貨期 現(xiàn)貨供應(yīng)
有效期 6個(gè)月 用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)使用
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氮代謝系列_亞硝酸還原酶(NiR)測試盒

測定方法:微量法

產(chǎn)品規(guī)格:100管/48樣

注    意:正式測定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。

測定意義:

硝酸還原酶(NiR)是一類能催化亞硝酸鹽還原的酶,廣泛存在于微生物及植物體內(nèi),是自然界氮循環(huán)過程中的關(guān)鍵酶,可以將亞硝酸鹽降解為NO或NH3,從而減少環(huán)境中亞硝態(tài)氮的積累,降低因亞硝酸鹽累積而造成的對生物體的毒害作用。

氮代謝系列_亞硝酸還原酶(NiR)測試盒

測定原理:

亞硝酸還原酶可將NO2—還原為NO,使樣品中參與重氮化反應(yīng)生成紫紅色化合物的NO2—減少,即540nm處吸光值的變化可反映亞硝酸還原酶的活性。

需自備的儀器和用品:天平、研缽、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、水浴鍋、低溫離心機(jī)。

試劑的組成和配制:

提取液:液體112mL×1瓶,4℃保存。

試劑一:液體4mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加5mL蒸餾水溶解。

試劑三:液體5mL×1瓶,4℃保存。(如出現(xiàn)沉淀可以70-80℃加熱溶解)

試劑四:液體10mL×1瓶,4℃避光保存。(如出現(xiàn)沉淀可以70-80℃加熱溶解)

試劑五:液體10mL×1瓶,4℃避光保存。

工作液:臨用前根據(jù)用量將試劑四和試劑五以1:1的比例混合。

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酶液提取:

1. 組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。10000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

2.細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);然后10000g,4℃離心10min,取上清置于冰上待測。

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