從今開始，公司所售ELISA試劑盒均折扣銷售，我們提供多種屬、48T及96T兩種規(guī)格，售前、售中、售后等服務(wù)方面，周到、細(xì)致，并立體式優(yōu)勢呈現(xiàn)ELISA實(shí)驗(yàn)技術(shù)，實(shí)現(xiàn)ELISA實(shí)驗(yàn)的用戶體驗(yàn)。

血清標(biāo)本宜在新鮮時檢測。如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。如在冰箱中保存過久，其中的可發(fā)生聚合，在間接法ELISA中可使本底加深。一般說來，在5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃，超過一周測定的需低溫冰存。凍結(jié)血清融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛倒混和，不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩。混濁或有沉淀的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過濾，澄清后再檢測。反復(fù)凍融會使抗體效價跌落，所以測抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測，宜少量分裝冰存。保存血清自采集時就應(yīng)注意無菌操作，也可加入適當(dāng)防腐劑。

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假如背景過高，而您懷疑洗滌不夠時，可以嘗試增加洗滌次數(shù)。這種封鎖液便宜、不亂，在去除洗滌過程中的一些非特異結(jié)合上很有用。假如濃渡過高，或者未準(zhǔn)確稀釋，則會導(dǎo)致高背景。常用的蛋白封鎖液包括牛血清白蛋白（BSA）、脫脂奶粉、正常血清和魚明膠。封鎖液的作用是讓不相關(guān)的蛋白占據(jù)微孔板中潛伏的結(jié)合位點(diǎn)。ELISA實(shí)驗(yàn)的原理好像很簡樸，不過乎固定抗原，添加一抗、二抗和底物，間中夾雜著洗滌和封鎖。

假如您的背景過高，懷疑封鎖不充分，那么您可以嘗試使用更高濃度的封鎖液，或適當(dāng)延長封鎖時間。血清組分的內(nèi)在多樣性可使它有效攔截很多不同類型的分子相互作用。另一個選擇是使用蛋白和非離子型去污劑這兩種封鎖液，后者可協(xié)助洗滌過程中的封鎖。解決這個題目的一種方法是使用雞或魚的正常血清。好的封鎖液應(yīng)降低非特異性結(jié)合，但它不應(yīng)當(dāng)與抗原、抗體或檢測試劑發(fā)生相互作用。在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時，我們是否能獲得有意義的信息，這在很大程度上取決于結(jié)果的信噪比。

假如您的ELISA不幸地碰到了高背景，那么也無需太擔(dān)心，依次查看ELISA系統(tǒng)中的組分，并排除可能存在的題目。記住，非特異的抗體結(jié)合會增加背景。不外，它的缺點(diǎn)在于能與Protein A和IgG抗體相互作用。為了防止這一點(diǎn)，切勿使用過多的一抗或二抗。請勿使用高濃度（正常濃度為0.01-0.1%），它會降低特異結(jié)合，產(chǎn)生假陰性。這就降低了可產(chǎn)生信號的抗體非特異結(jié)合的機(jī)會。目前主要有兩種類型的封鎖液：蛋白和非離子型去污劑。您當(dāng)然也希望抗體只與目的蛋白結(jié)合吧。

假如背景您一直被背景題目所困擾，那么也許您該花些時間來優(yōu)化封鎖液。