魚Bcl-2相關(guān)X(BAX)ELISA試劑盒實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中魚 Bcl-2 相關(guān) X(BAX)。用純化的魚Bcl-2相關(guān) X
(BAX)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入Bcl-2(BAX)，再與 HRP標記的 Bcl-2相關(guān)X (BAX)抗體 ，形成抗體-抗原-酶相關(guān)X標抗體復合物，經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的 Bcl-2相關(guān)X (BAX)呈正相關(guān)。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中魚 Bcl-2 相關(guān) X(BAX)濃度。
魚Bcl-2相關(guān)X(BAX)ELISA試劑盒操作步驟
1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50?l，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40?l，然后再加待測樣品 10?l（樣品zui終稀釋度為 5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
溫育：用封板膜封板后37℃溫育30分鐘。30倍稀釋后備用
配液：將 30倍濃
洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體甩干，每孔加滿洗滌液，靜重復 5次，拍干。30秒后棄去，如此
加酶：每孔加入酶標試劑 50?l，空白孔除外。
溫育：操作同 3。
洗滌：操作同 5。
顯色：每孔先加入顯色劑 A50?l，再加入顯色劑 B50?l，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，牛病毒性腹瀉抗體（BVDV Ab）ELISA試劑盒在坐標紙上，魚Bcl-2相關(guān)X(BAX)ELISA試劑盒根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的 OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。
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