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上海酶聯(lián)生物研究所


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免費代測人CXC趨化因子配體9ELISA 檢測試劑盒

閱讀:437發(fā)布時間:2014-02-10

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    上海酶聯(lián)生物研究所

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本試劑僅供研究使用  標(biāo)本:組織勻漿

 

試驗原理:

CXCL-9試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知CXCL-9濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進行檢測。先將CXCL-9和*標(biāo)記的抗體同時溫育。人CXC趨化因子配體9ELISA 檢測試劑盒洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中CXCL-9的濃度呈比例關(guān)系。

自備材料

蒸餾水。
加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
振蕩器及磁力攪拌器等。

 

安全性

避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

 

操作注意事項

試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。人CXC趨化因子配體9ELISA 檢測試劑盒底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

 

樣品收集、處理及保存方法

血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

 

試劑的準(zhǔn)備

標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準(zhǔn)備,不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。

洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。

 

操作步驟

使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的*標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
在450nm波長處測定各孔的OD值。

 

局限

6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到的結(jié)果。

 

試劑盒性能

1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。

2. 特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。

3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

 

結(jié) 果 判 斷 與 分 析

1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值

 

2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的CXCL-9標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的CXCL-9含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。

 

3、檢測值范圍:0-800pg/ml

 

4、敏感度: 1.0 pg/ml

大鼠Toll樣受體4(TLR4)ELISA試劑盒 Rat Toll-like receptor 4,TLR4 ELISA Kit Y35250 96T/48T
大鼠多巴胺轉(zhuǎn)運蛋白(DAT)ELISA試劑盒 Rat dopamine transporter,DAT ELISA Kit Y35251 96T/48T
大鼠多巴胺D2受體(D2R)ELISA試劑盒 Rat dopamine D2 receptor,D2R ELISA Kit Y35252 96T/48T
大鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA試劑盒 Rat amyloid beta peptide 1-42,Aβ1-42 ELISA Kit Y35253 96T/48T
大鼠CD44分子(CD44)ELISA試劑盒  Rat cluster Of differentiation,CD44 ELISA Kit Y35254 96T/48T
大鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA試劑盒  Rat 8-Hydroxy-desoxyguanosine,8-OHdG ELISA Kit Y35255 96T/48T
大鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒 Rat Interleukin 1 receptor antagonist, IL-1ra ELISA Kit Y35256 96T/48T
大鼠胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒  Rat insulin autoantibodies,IAA ELISA Kit Y35257 96T/48T
大鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)ELISA試劑盒 Rat Anti-glucoprotein 210,GP210 ELISA Kit Y35258 96T/48T
大鼠可溶性Toll樣受體6(sTLR6)ELISA試劑盒 Rat soluble Toll-like receptor 6,sTLR-6 ELISA Kit Y35259 96T/48T
大鼠可溶性Toll樣受體2(sTLR2)ELISA試劑盒 Rat soluble Toll-like receptor 2,sTLR-2 ELISA Kit Y35260 96T/48T
大鼠前列腺素F2α(PGF2α)ELISA試劑盒 Rat Prostaglandin F2α,PGF2α ELISA Kit Y35261 96T/48T
大鼠白三烯E4(LTE4)ELISA試劑盒 Rat leukotriene E4,LT-E4 ELISA Kit Y35262 96T/48T
大鼠*(UK)ELISA試劑盒 Rat urokinase,UK ELISA Kit Y35263 96T/48T
大鼠*Ⅻ(FⅫ)ELISA試劑盒  Rat coagulation factor Ⅻ,FⅫ ELISA Kit Y35264 96T/48T
大鼠*ⅩⅢ(FⅩⅢ)ELISA試劑盒 Rat coagulation factor ⅩⅢ,FⅩⅢ ELISA Kit Y35265 96T/48T
大鼠*Ⅲ(FⅢ)ELISA試劑盒 Rat coagulation factor Ⅲ,FⅢ ELISA Kit Y35266 96T/48T
大鼠載脂蛋白H(Apo-H)ELISA試劑盒  Rat Apolipoprotein H,Apo-H ELISA Kit Y35267 96T/48T
大鼠白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒  Rat Interleukin-2 receptor,IL-2R ELISA Kit Y35268 96T/48T
大鼠腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA試劑盒  Rat adrenomedullin,ADM ELISA Kit Y35269 96T/48T
大鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)ELISA試劑盒 Rat Beta-Endorphin receptor,β-EPR ELISA Kit Y35270 96T/48T
大鼠鈣/鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶2(CAMK 2)ELISA試劑盒 Rat calcium/calmodulin-dependent protein kinase-Ⅱ,CAMK 2 ELISA Kit Y35271 96T/48T
大鼠肝脂酶(HL)ELISA試劑盒 Rat hepatic lipase,HL ELISA Kit Y35272 96T/48T
大鼠煙堿型乙酰*受體(N-AChR)ELISA試劑盒 Rat nicotinic acetylcholine receptor,N-AChR ELISA Kit Y35273 96T/48T
大鼠毒蕈堿型乙酰*受體(M-AChR)ELISA試劑盒  Rat muscarinic acetylcholine receptor,M-AChR ELISA Kit Y35274 96T/48T
大鼠活化蛋白C(APC)ELISA試劑盒 Rat activated人CXC趨化因子配體9ELISA 檢測試劑盒 protein C,APC ELISA Kit Y35275 96T/48T
大鼠甘丙肽/甘丙素(GAL)ELISA試劑盒 Rat galanin,GAL ELISA Kit Y35276 96T/48T
大鼠α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISA試劑盒 Rat α-Glucosidase,a-Glu ELISA Kit Y35277 96T/48T
大鼠破骨細(xì)胞分化因子(ODF)ELISA試劑盒 Rat osteoclast differentiation factor,ODF ELISA Kit  Y35278 96T/48T
大鼠Toll樣受體9(TLR-9/CD289)ELISA試劑盒  Rat Toll-like receptor 9,TLR-9 ELISA Kit  Y35279 96T/48T


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