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豬腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒

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更新時(shí)間:2016-06-24 16:48:51瀏覽次數(shù):157次

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豬腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒●規(guī)格: 96T/48T
●品牌:子科生物ZIKER
●反應(yīng)時(shí)間: 1-5h
●所需樣本體積: 50-100ul
●檢測(cè)波長(zhǎng): 450 nm
●用途: For research use only. Not for diagnostic use.
●特點(diǎn):靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好
●服務(wù):子科生物所有的elisa試劑盒均可免費(fèi)代測(cè),全程Elisa實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)。
●運(yùn)輸:全國(guó)各地快遞免費(fèi)送貨上門,低溫運(yùn)輸,用冰袋加泡沫保溫盒包裝,確保產(chǎn)品運(yùn)輸狀態(tài)下也處于低溫狀態(tài)。

豬腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的原理似乎很簡(jiǎn)單,不外乎固定抗原,添加一抗、二抗和底物,間中夾雜著洗滌和封閉。然而,即使是平淡無(wú)奇的洗滌和封閉,如果做得不太好,也有可能毀了整個(gè)實(shí)驗(yàn)。在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),我們是否能獲得有意義的信息,這在很大程度上取決于結(jié)果的信噪比。背景噪音會(huì)影響您對(duì)結(jié)果的判斷。如何降低ELISA的背景,下面有一些tips。
洗滌很重要
洗滌步驟看似很無(wú)聊,其實(shí)很重要,因?yàn)槿绻唇Y(jié)合的材料(如非特異結(jié)合的抗體或檢測(cè)試劑)殘留在微孔板中,那么它會(huì)增加背景噪音。如有必要,可增加洗滌液中的鹽濃度,這會(huì)阻止非特異結(jié)合反應(yīng)。如果背景過(guò)高,而您懷疑洗滌不夠時(shí),可以嘗試增加洗滌次數(shù)。
封閉更關(guān)鍵
封閉液的作用是讓不相關(guān)的蛋白占據(jù)微孔板中潛在的結(jié)合位點(diǎn)。這就降低了可產(chǎn)生信號(hào)的抗體非特異結(jié)合的機(jī)會(huì)。您當(dāng)然也希望抗體只與目的蛋白結(jié)合吧。如果您的背景過(guò)高,懷疑封閉不充分,那么您可以嘗試使用更高濃度的封閉液,或適當(dāng)延長(zhǎng)封閉時(shí)間。
如果您一直被背景問(wèn)題所困擾,那么也許您該花些時(shí)間來(lái)優(yōu)化封閉液。這可能需要時(shí)間,但也是值得的。目前主要有兩種類型的封閉液:蛋白和非離子型去污劑。您使用的類型須取決于多個(gè)因素,包括微孔板的表面試劑、吸附的抗原、您的抗體和檢測(cè)試劑。好的封閉液應(yīng)降低非特異性結(jié)合,但它不應(yīng)當(dāng)與抗原、抗體或檢測(cè)試劑發(fā)生相互作用。
zui常用的非離子型去污劑是Tween-20。這種封閉液便宜、穩(wěn)定,在去除洗滌過(guò)程中的一些非特異結(jié)合上很有用。但它們只在存在時(shí)起作用,因?yàn)楹苋菀妆幌吹?。因此所有洗滌液中也必須添加封閉液。請(qǐng)勿使用高濃度(正常濃度為0.01-0.1%),它會(huì)降低特異結(jié)合,產(chǎn)生假陰性。另一個(gè)選擇是使用蛋白和非離子型去污劑這兩種封閉液,后者可協(xié)助洗滌過(guò)程中的封閉。
蛋白封閉液則有所不同,是*的。它們與開(kāi)放位點(diǎn)結(jié)合并封閉,同時(shí)穩(wěn)定與微孔板結(jié)合的抗原分子。常用的蛋白封閉液包括牛血清白蛋白(BSA)、脫脂奶粉、正常血清和魚明膠。血清組分的內(nèi)在多樣性可使它有效攔截許多不同類型的分子相互作用。不過(guò),它的缺點(diǎn)在于能與Protein A和IgG抗體相互作用。解決這個(gè)問(wèn)題的一種方法是使用雞或魚的正常血清。
抗體濃度須優(yōu)化
我們通常會(huì)記錄每次試驗(yàn)留下來(lái)的操作步驟,但是如果試劑稍有不同,則可能需要優(yōu)化抗體的量。記住,非特異的抗體結(jié)合會(huì)增加背景。為了防止這一點(diǎn),切勿使用過(guò)多的一抗或二抗。
檢測(cè)試劑要適量
另一點(diǎn)也很顯而易見(jiàn):切勿使用過(guò)多的檢測(cè)試劑。如果濃度過(guò)高,或者未正確稀釋,則會(huì)導(dǎo)致高背景。也不要顯色過(guò)度,如有必要,優(yōu)化一下何時(shí)應(yīng)加入終止液。
如果您的ELISA不幸地遇到了高背景,那么也無(wú)需太擔(dān)心,依次查看ELISA系統(tǒng)中的組分,并排除可能存在的問(wèn)題。悉心優(yōu)化,相信很快就會(huì)有漂亮的結(jié)果。

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Quest Rhod-4™, sodium salt     Quest Rhod-4™鈉鹽    5x50 µg    2~3周            
Coelenterazine             腔腸素    250 µg    2~3周    55779-48-1    C26H21N3O3    423.46 
Coelenterazine cp        腔腸素cp    250 µg    2~3周            415.48 
Coelenterazine f          腔腸素f    250 µg    2~3周            425.45 
Coelenterazine h          腔腸素h     250 µg    現(xiàn)貨            407.46 
Coelenterazine hcp     腔腸素hcp    250 µg    2~3周            399.48 
Coelenterazine n          腔腸素n    250 µg    2~3周            457.52 
Coelenterazine             腔腸素    1 mg    2~3周    55779-48-1    C26H21N3O3    423.46 
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Ratio Works™ pH sensor I *Cell-permeable*     Ratio Works™ pH檢測(cè)劑I(細(xì)胞可透性)    5 mg    1~2周            
Ratio Works™ pH sensor II *Cell-permeable*     Ratio Works™ pH檢測(cè)劑II(細(xì)胞可透性)    5 mg    1~2周            
Ratio Works™ pH sensor III *Cell-permeable*    Ratio Works™ pH檢測(cè)劑III(細(xì)胞可透性)    5 mg    1~2周            
MEQ [6-Methoxy-N-ethylquinolinium iodide]    MEQ     100 mg    2~3周    34373-76-7    C12H14INO    315.15 
SPQ [6-Methoxy-N-(3-sulfopropyl)quinolinium]    SPQ    50 mg    2~3周            281.33 
TSQ [N-(6-Methoxy-8-quinolyl)-p-toluenesulfonamide]    TSQ     25 mg    2~3周            328.38 
MQAE [N-(Ethoxycarbonylmethyl)-6-methoxyquinolinium bromide]    MQAE     100 mg    2~3周            326.19 
Lucigenin [Bis-N-methylacridinium nitrate]      N,N二甲基二吖啶硝酸鹽;光澤精    10 mg    2~3周    2315-97-1    C28H22N4O6    510.50 
Ratio Works™ redox sensor *Cell-permeable*      氧化還原檢測(cè)劑(細(xì)胞可透性)    1 mg    1~2周            
DiZIKERC4(5) [Bis-(1,3-dibutylZIKERrbituric acid)pentamethine oxonol]    DiZIKERC4(5)     25 mg    2~3周    63560-89-4    C29H42N4O6    542.67 
DiZIKERC4(3) [Bis-(1,3-dibutylZIKERrbituric acid)trimethine oxonol]    DiZIKERC4(3)    25 mg    2~3周    70363-83-6    C27H39N4O6    515.62 
DiSZIKERC2(5) [Bis-(1,3-diethylthioZIKERrbituric acid)pentamethine oxonol]    DiSZIKERC2(5)    25 mg    2~3周            
DiSZIKERC2(3) [Bis-(1,3-diethylthioZIKERrbituric acid)trimethine oxonol]    DiSZIKERC2(3)     25 mg    2~3周            436.55 
Oxonol V [Bis-(3-phenyl-5-oxoisoxazol-4-yl)pentamethine oxonol]    Oxonol V     25 mg    2~3周    61389-30-8    C23H16N2O4    384.38 
Oxonol VI [Bis-(3-propyl-5-oxoisoxazol-4-yl)pentamethine oxonol]    Oxonol VI     25 mg    2~3周    64724-75-0    C17H20N2O4    316.35 
RH 237 [N-(4-Sulfobutyl)-4-(6-(4-(dibutylamino)phenyl)hexatrienyl)pyridinium, inner salt]    RH 237    5 mg    3~4周            496.70 
RH 421 [N-(4-Sulfobutyl)-4-(4-(4- (dipentylamino)phenyl)butadienyl)pyridinium, inner salt]    RH 421    25 mg    3~4周    107610-19-5    C29H42N2O3S    498.72 
MM 1-43 [N-(3-Triethylammoniumpropyl)-4-(4-(dibutylamino)styryl)pyridinium dibromide] *FM 1-43*    MM 1-43     5 mg    3~4周            611.54 
RH 414 [N-(3-Triethylammoniumpropyl)-4-(4-(4-(diethylamino)phenyl)butadienyl)pyridinium dibromide]    RH 414     5 mg    3~4周            581.47 

 

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