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名稱 RF/6A細胞(猴脈絡膜-視網膜內皮細胞)
種屬 猴
年齡(性別) 胚胎
組織來源 脈絡膜;視網膜;內皮細胞;正常
生長特性 貼壁細胞
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
背景描述 RF/6A細胞在早期自發(fā)轉化并已傳代540次以上;電鏡下觀察到Weibel-Palade顆粒。高代次的RF/6A細胞用作滋養(yǎng)層以增強貼壁,轉接能力和供養(yǎng)眼色素層黑素細胞。
RF/6A細胞(猴脈絡膜-視網膜內皮細胞)生物安全等級 1
生長培養(yǎng)基 MEM(PM150467)+10% FBS(164210-500)+1% P/S(PB180120)
推薦傳代比例 1:2-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
凍存條件 凍存液:55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO溫度:液氮
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%溫度:37℃
基因表達情況 factor VIII; fibronectin
保藏機構 ATCC; CRL-1780
細流式檢測細胞凋亡的數(shù)據(jù)分析方法:
1) 選中所有顆粒,將FSC和SSC設置成對數(shù)坐標軸模式備用;
2) 將橫軸和縱軸分別設成Annexin通道和PI通道(7-AAD與此類似),選取雙陰細胞群;
3) 在雙陰細胞門中,將橫軸和縱軸分別設成FCS和SSC,將數(shù)據(jù)呈現(xiàn)方式改為輪廓圖,找到細胞碎片,劃出碎片門,應用于所有細胞;
4) 在所有細胞中,反選碎片門,得到所有細胞;
5) 將橫軸和縱軸分別設成Annexin通道和PI通道,參照未經藥物處理的對照組,劃出十字門,確定不同群細胞的比例。
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