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10000×Sybr Green II核酸染料分子生物試劑

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更新時(shí)間：2023-05-09 13:45:59瀏覽次數(shù)：279次

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上海閃晶分子生物科技有限公司

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

SYBR Green II主要用于RNA和單鏈DNA電泳。是EB和替代品，無致癌性，超敏感性。用作常規(guī)電泳時(shí)，須將商品化的核酸MARKER作一定倍數(shù)的稀釋（1/5-1/10），這樣才能得到比較理想結(jié)果。

詳細(xì)介紹

10000×Sybr Green II核酸染料

產(chǎn)品特點(diǎn)：

● 無毒性：屬花箐類染料，容易生物降解，無致癌毒性。

● 靈敏度高：至少可檢出20pg ssDNA或RNA，高于EB染色法25～100倍。

● 信噪比高：樣品熒光信號(hào)強(qiáng)，背景信號(hào)低。

● 操作簡(jiǎn)單：與EB一樣，在預(yù)制膠和電泳過程中染料不降解;而電泳后染色過程也只需30分鐘且無需脫色或沖洗，即可直接用紫外凝膠透射儀或可見光透射儀觀察。

● 適用范圍廣：可選擇電泳前染色(膠染法)或電泳后染色(泡染法);適用于瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳、脈沖電場(chǎng)凝膠電泳和毛細(xì)管電泳等;可用于 ssDNA 或 RNA 染色。

● 使用方便：對(duì)分子生物學(xué)中常用的酶(如：Taq 酶、反轉(zhuǎn)錄酶、內(nèi)切酶、T4連接酶等)沒有抑制作用。

● 經(jīng)濟(jì)：價(jià)格比銀染便宜。

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RF026	100ul	800.00	Sybr Green II熒光染料

使用方法：

1.膠染法(用法同EB)(推薦方法)

　　(1) 熔膠后，冷卻膠至50℃左右，加入Sybr Green II 核酸染料。每100mL膠中加入3～5μL Sybr Green II 10,000× 儲(chǔ)液，以此比例類推。

　　(2) 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。

　　注意事項(xiàng)：

　　(1) 此方法染色可以準(zhǔn)確確定核酸片段分子量，染料用量相對(duì)較少。1mL染料大約可以做300塊 100mL的膠。

　　(2) 由于Sybr Green II熱穩(wěn)定性較差，不能在熱的膠溶液中直接添加，需要等待溶液冷卻至50℃左右才能添加。搖晃，振蕩或者翻轉(zhuǎn)以保證染料充分混勻。

　　2.泡染法

　　(1) 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。

　　(2) 用pH 7.0～8.5 的緩沖液(如：TAE，TBE 或 TE)，按照10000﹕1的比例稀釋Sybr Green II 10,000× 儲(chǔ)液，混勻，制成1× 染色液。

　　(3) 將凝膠小心地放入合適的容器中，如聚丙烯容器中。緩慢加入足量的1× 染色液浸沒凝膠。用鋁箔等蓋住容器使染料避光。室溫振蕩染色10～30分鐘，染色時(shí)間因凝膠濃度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝膠直接在玻璃平皿上染色，將配好的1× 染色液輕輕地倒在膠板上，讓其均勻地覆蓋整個(gè)膠板，并染色30分鐘。玻璃平皿必須預(yù)先經(jīng)過硅烷化溶液處理(避免染料吸附在玻璃表面上)。

　　注：用泡染法染色時(shí)，可以精確確定核酸片段分子量。但染料用量較多。

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