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新型細(xì)胞芯片讓功能基因組學(xué)變得微小

時(shí)間:2012-5-21閱讀:544
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 來(lái)自博德研究所的研究人員開(kāi)發(fā)了一種稱(chēng)為MicroSCALE(空間局限粘性慢病毒特征芯片)新型的、便攜式的“細(xì)胞芯片”,這種芯片克服了現(xiàn)有功能基因組學(xué)方法的局限。這一篩選設(shè)備代表了該平臺(tái)探究基因功能的工具箱中另一個(gè)創(chuàng)新工具。

上接:Science子刊:功能基因組學(xué)新型平臺(tái)
這種板可隨后被存放至冰箱中,直至科學(xué)家們準(zhǔn)備開(kāi)始一項(xiàng)篩查試驗(yàn),就將細(xì)胞種植在板中。將芯片孵育數(shù)天使病毒能夠開(kāi)啟或關(guān)閉細(xì)胞中的基因,科學(xué)家們就可以用一種藥物或環(huán)境條件來(lái)處理這些細(xì)胞。無(wú)需顯微鏡,隨后掃描載玻片可快速方便地定量廣泛的熒光標(biāo)記的特征。

利用在手的新設(shè)備,該研究小組瞄準(zhǔn)了一個(gè)真實(shí)的新興的臨床問(wèn)題:黑色素瘤的耐藥性。黑色素瘤是zui致命的一種皮膚癌。一半的黑色素瘤包含一種BRAF基因突變。FDA近期批準(zhǔn)了一種強(qiáng)效新藥能夠抑制突變BRAF,在患者中促使腫瘤縮小。然而這一成效是短暫的:一年后癌癥會(huì)再度復(fù)發(fā)。
Wood.說(shuō):“了解從初始狀態(tài)對(duì)藥物反應(yīng)良好到耐藥狀態(tài)過(guò)程中腫瘤中發(fā)生的事件,是一個(gè)真正有趣的生物學(xué)問(wèn)題。”

Wood和他的同事們將細(xì)胞芯片視為大規(guī)模檢測(cè)耐藥性的一條有前景的途徑。與博德研究所資深準(zhǔn)會(huì)員Levi Garraway合作,他們開(kāi)始在黑色素瘤細(xì)胞上檢測(cè)了這一BRAF靶向藥物,重新發(fā)現(xiàn)了已知在對(duì)該藥耐受中發(fā)揮作用的基因和信號(hào)通路。
研究小組接下來(lái)想要測(cè)試芯片揭示新耐藥基因的能力。他們將黑色素瘤細(xì)胞種植到包含攜帶ORF的病毒過(guò)表達(dá)蛋白激酶家族基因的的芯片上。每個(gè)芯片用一種與BRAF靶向藥物相關(guān)的藥物處理。研究人員在每張芯片上看到了相同的存活細(xì)胞特征性模式。“這不僅告訴我們個(gè)別基因可能賦予抗性,還告訴了我們它們是如何協(xié)同作用以及一種藥物的特殊生物學(xué)機(jī)制是如何影響細(xì)胞產(chǎn)生抗性的能力的,”Wood解釋說(shuō)。

在芯片上測(cè)試更廣泛的藥物后,研究人員生成了一些具有啟示作用的研究發(fā)現(xiàn)。一些基因似乎賦予了對(duì)特定藥物的抗性,這些基因的模式使得研究人員推論出此前未知的藥物作用機(jī)制。他們還觀察到靶向相似生物學(xué)過(guò)程的一些藥物傾向于產(chǎn)生非常相似的賦予抗性基因圖譜,這一發(fā)現(xiàn)具有潛在的臨床意義。醫(yī)生往往通過(guò)給予一線和二線治療靶向相同的信號(hào)通路來(lái)試圖對(duì)抗耐藥,但是這些研究結(jié)果表明聯(lián)合靶向獨(dú)立信號(hào)通路的藥物是一種更好的避免耐藥的途徑。
該研究小組正在密切關(guān)注一類(lèi)稱(chēng)為有絲分裂原激活蛋白激酶(MAPK)抑制劑的藥物,他們用芯片驗(yàn)證了在黑色素瘤藥物耐受中一種稱(chēng)為NF-kB細(xì)胞信號(hào)通路的作用。他們還用真正的患者樣本驗(yàn)證了這些結(jié)果,表明NF-kB信號(hào)通路活性與藥物敏感性相關(guān)。Wood解釋說(shuō)這一研究發(fā)現(xiàn)可能是非常強(qiáng)有力的,因?yàn)樗锌赡茉谀骋惶鞄椭A(yù)測(cè)哪些患者將對(duì)藥物產(chǎn)生反應(yīng)或是為開(kāi)發(fā)出抑制該信號(hào)通路和避免耐受的藥物鋪平道路。重要的是,它與當(dāng)前聯(lián)合MAPK抑制劑和已知激活NF-kB信號(hào)通路的免疫治療的臨床試驗(yàn)相關(guān)聯(lián)。“我們的結(jié)果表明這些聯(lián)合治療可能會(huì)無(wú)意中導(dǎo)致耐藥性,而不是防止它,”Wood說(shuō)。

該芯片目前還在原型階段,但是Sabatini、Wood和RNAi平臺(tái)主管以及研究的共同作者David Root希望看到這一技術(shù)成為進(jìn)行篩選的一個(gè)廣泛可用的選擇。“用MicroSCALE芯片進(jìn)行篩選的簡(jiǎn)易性是顯著的,”Wood說(shuō)。通過(guò)縮小篩查的過(guò)程,該芯片為利用極少量的細(xì)胞例如來(lái)自腫瘤活檢的原代細(xì)胞開(kāi)展大規(guī)模篩查開(kāi)啟了大門(mén)。它不會(huì)取代現(xiàn)有的多孔板或混合篩查方法,但是卻可以提供互補(bǔ)。“它正在構(gòu)建一個(gè)選擇庫(kù),使得我們能夠繼續(xù)探究更多更重要的生物學(xué)問(wèn)題。”

來(lái)源:生物通

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