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口腔鱗狀細(xì)胞癌的方法

時間:2013-1-18閱讀:475
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口腔鱗狀細(xì)胞癌的方法
細(xì)胞培養(yǎng)
CAL27(人類鱗狀細(xì)胞癌),GH354(人子宮頸腺癌),HTB-32(人宮頸癌)細(xì)胞系,獲得自美國典型培養(yǎng)物保藏中心。CAL27細(xì)胞被保持在Dulbecco的改性的中等(DMEM)中,4 mM的L-*,調(diào)整含有3.7 g / L的鈉碳酸氫鹽和4.5星,g / L的葡萄糖,1%*(10,000單位/毫升),*(10,000微克/ mL)的溶液和10%胎牛血清(FBS)來自上??婆d生物試劑有限公司75厘米2 BD治療組織培養(yǎng)燒瓶中,在37℃下和5%CO 2在加濕室。GH354細(xì)胞也保持作為與另外的20%FBS的描述。1.5mM的L-*,從ATCC 2200 mg / L的*,和10%FBS,HTB-32細(xì)胞保持在McCoy的培養(yǎng)基。

細(xì)胞活力
電鍍前細(xì)胞(粘附,增殖試驗),*處理細(xì)胞的等分試樣使用臺盼藍(lán)和活細(xì)胞進(jìn)行染色,通過臺盼藍(lán)陰性細(xì)胞的數(shù)量進(jìn)行計數(shù),使用VWR科學(xué)計數(shù)商會枚舉和在Zeiss Axiovert 40倒置顯微鏡。在每一個時間點(diǎn)(1-3天),多口井進(jìn)行了處理,采用臺盼染色,活細(xì)胞使用該程序枚舉。
它的增殖
HPV感染改變口腔鱗狀細(xì)胞癌的增殖潛力,為了驗證我們的假設(shè),我們進(jìn)行了CAL27細(xì)胞體外增殖實驗,以確定的相對影響HPV16轉(zhuǎn)。CAL27,CAL27模擬的轉(zhuǎn)染(MTF)和CAL27轉(zhuǎn)染(HPV16)鋪板在含有牛胎兒血清(FBS),以及在不含有血清(NS)的培養(yǎng)基的培養(yǎng)基中,并測定它們的擴(kuò)散超過三天,在三個單獨(dú)的,獨(dú)立的實驗。我們的研究結(jié)果表明,在顯著更高的速度從第1天-第3天CAL27-HPV16細(xì)胞增殖,增加5倍以上CAL27中的FBS的媒體(N = 48,P <0.01)。此外,CAL27-HPV16細(xì)胞能夠增殖,即使在沒有血清的速率顯著高于非轉(zhuǎn)染CAL27細(xì)胞,增加超過3.5倍,從第1天到第3天的組(n = 48,對< 0.01)。

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