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參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：藍舌病病毒(BTV)定性PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品貨號：CP100134
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品分類：RT-PCR法
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

實驗過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
使用方法：
一、樣品DNA的制備
用自選方法提取細菌樣品DNA。注意：DNA純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA，后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備O157:H7標(biāo)準(zhǔn)曲線（以10-10E6這6個10倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記6個離心管，分別為6，5，4，3，2和1號。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用TE緩沖液或超純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至10E7拷貝/μL，建議每次稀釋10倍，梯度稀釋至10E7拷貝/μL）。
4. 在6號管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得10E6拷貝/μL的陽性對照。
5. 換槍頭，從6號管中取5 μL溶液到5號管中，充分震蕩1分鐘，得10E5拷貝/μL的陽性對照。
6. 換槍頭，從5號管中取5 μL溶液到4號管中，重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。
7. NC管中不加任何陽性對照。
8. 從1-6號管中分別取5 μL和待測樣品一起進行定量PCR（見下步），每個樣品做3次重復(fù)。PCR后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光PCR Ct值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
楊奇青霉1號染色體開放閱讀框84抗體Human NPYR5(Neuropeptide Y Receptor Y5) ELISA Kit人腎上腺髓質(zhì)素(ADM)免疫試劑盒

沙諾氏芽孢桿菌E3泛素蛋白連接酶CHIP蛋白抗體Human NRG-3(Neuregulin 3) ELISA Kit人腎上腺素能a1A受體(ADRA1A)免疫試劑盒

幼角鐮孢肉堿O-乙?；D(zhuǎn)移酶Human OVA sIgE(Ovalbumin Specific IgE) ELISA Kit人腎上腺素(EPI)免疫試劑盒

黑色附球霉5號染色體開放閱讀框45抗體Human OVA sIgG(Ovalbumin Specific IgG) ELISA Kit人腎上腺皮質(zhì)抗體(ACA)免疫試劑盒

大腸埃希菌5號染色體開放閱讀框48抗體Human OXA(Orexin A) ELISA Kit人蛋白(nephrin)免疫試劑盒

雅致枝霉6號染色體開放閱讀框136抗體Human NRG-4(Neuregulin 4) ELISA Kit人腎酶(RNLS/MAO-C)免疫試劑盒

棒桿菌6號染色體開放閱讀框138抗體Human PCIII(Procollagen III) ELISA Kit人神經(jīng)軸突絲蛋白(NAFP)自身抗體免疫試劑盒

季也蒙邁耶氏酵母6號染色體開放閱讀框145抗體Human PCI(Protein C Inhibitor) ELISA Kit人神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP)免疫試劑盒

大孔菌CD39抗體Human PDIA5(Protein Disulfide Isomerase A5) ELISA Kit人神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)免疫試劑盒

嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌6號染色體開放閱讀框106抗體Human PDIA6(Protein Disulfide Isomerase A6) ELISA Kit人神經(jīng)型一氧化氮合成酶(nNOS)免疫試劑盒

黃色糖多孢菌6號染色體開放閱讀框115抗體Human PDK4(Pyruvate Dehydrogenase Kinase Isozyme 4) ELISA Kit人神經(jīng)粘著分子(NRCAM)免疫試劑盒

居真菌細菌屬6號染色體開放閱讀框123抗體Human PCNA(ProlifeRating Cell Nuclear Antigen) ELISA Kit人神經(jīng)粘附分子配體1(NCAM-L1/CD171)免疫試劑盒

少根根霉6號染色體開放閱讀框129抗體Human PDP(Pyruvate Dehydrogenase Phosphatase) ELISA Kit人神經(jīng)特異性烯化酶(NSE)免疫試劑盒

纖維單胞菌6號染色體開放閱讀框129抗體Human NT-ProANP(N-Terminal Pro Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit人神經(jīng)肽Nesfatin-1 免疫試劑盒

金黃桿菌6號染色體開放閱讀框132抗體Human PEX2(Peroxisomal Biogenesis Factor 2) ELISA Kit人神經(jīng)絲蛋白M(NF-M)免疫試劑盒

孔狀短小莖點霉磷酸化鈣調(diào)磷酸酶B亞基B1抗體Human PCPE1(Procollagen C Proteinase Enhancer 1) ELISA Kit人神經(jīng)絲蛋白L(NF-L)免疫試劑盒
藍舌病病毒(BTV)定性PCR檢測試劑盒除烴海桿狀菌Marinobacter│hydrocarbonoclasticus 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品骨保護素試劑盒D-棉籽糖;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書

根霉Rhizopus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品硫轉(zhuǎn)移酶pi基因試劑盒L-;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書

堅強芽孢桿菌Bacillus│firmus Bredemann and Werner 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR還原酶試劑盒;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書

泡盛曲霉Aspergillus│awamori 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%，標(biāo)準(zhǔn)品過氧化酶試劑盒低聚果糖-蔗果五糖;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證

桔灰青霉Penicillium│aurantiogriseum 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRS轉(zhuǎn)移酶TT試劑盒低聚果糖-蔗果四糖;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證

副豬嗜血桿菌Haemophilus│parasuis 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,S構(gòu)型，標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒低聚果糖-蔗果三糖;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證

金黃色葡萄球菌Staphylococcus│aureus 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品谷氨酰轉(zhuǎn)移酶6抗體試劑盒D-麥芽糖;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書

產(chǎn)氣莢膜梭菌 毒素D型Clostridium│perfringens Type D 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品谷氨酰轉(zhuǎn)移酶2抗體試劑盒檸檬酸;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書

海神弧菌Vibrio│neptunius 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品谷氨酰轉(zhuǎn)移酶2抗體試劑盒L-;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書