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玖久儀器帶您了解瓊脂糖電泳儀特點及應用

2013年12月03日 11:42:09人氣:1467來源:白山市玖久儀器儀表有限公司

  瓊脂糖凝膠具有網(wǎng)絡結構,物質分子通過時會受到阻力,大分子物質在涌動時受到的阻力大,因此在凝膠電泳中,帶電顆粒的分離不僅取決于凈電荷的性質和數(shù)量,而且還取決于分子大小,這就大大提高了分辨能力。但由于其孔徑相當大,對大多數(shù)蛋白質來說其分子篩效應微不足道,現(xiàn)廣泛應用于核酸的研究中。
  
  蛋白質和核酸會根據(jù)pH不同帶有不同電荷,在電場中受力大小不同,因此跑的速度不同,根據(jù)這個原理可將其分開。電泳緩沖液的pH在6~9之間,離子強度0.02~0.05為zui適。常用1%的瓊脂糖作為電泳支持物。瓊脂糖凝膠約可區(qū)分相差100bp的DNA片段,其分辨率雖比聚丙烯酰胺凝膠低,但它制備容易,分離范圍廣。
  
  普通瓊脂糖凝膠分離DNA的范圍為0.2-20kb,利用脈沖電泳,可分離高達10^7bp的DNA片段。DNA分子在瓊脂糖凝膠中泳動時有電荷效應和分子篩效應。DNA分子在高于等電點的pH溶液中帶負電荷,在電場中向正極移動。由于糖-磷酸骨架在結構上的重復性質,相同數(shù)量的雙鏈DNA幾乎具有等量的凈電荷,因此它們能以同樣的速率向正極方向移動。
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